抗4EBP1兔多克隆抗體（A300-501A）：兼顧靈敏與批次穩定性

一、產品概述

4EBP1（真核翻譯起始因子4E結合蛋白1）是mTORC1信號通路下游的關鍵翻譯抑制因子。由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的本產品（A300-501A）為針對人4EBP1蛋白的兔多克隆抗體，經抗原親和純化，適用于免疫組織化學（IHC）和蛋白質印跡（WB）檢測?？贵w識別表位位于4EBP1第75位氨基酸至C末端（第118位殘基）之間，可特異性結合人源4EBP1蛋白。

二、關鍵特性

參數 | 詳細信息

靶標 | 4EBP1

反應性 | 人

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第68位至C末端區域

同型 | IgG

偶聯物 | 未偶聯

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬 | 人

濃度 | 1000 ug/ml

保存條件 | 2 - 8 °C

有效期 | 收貨后1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊氮化鈉

三、生物學背景

4EBP1（真核翻譯起始因子4E結合蛋白1，基因名EIF4EBP1，Gene ID 1978，Uniprot Q13541）直接結合eIF4E，抑制翻譯起始復合物的組裝，發揮翻譯抑制功能。在生長因子刺激下，mTORC1復合物直接磷酸化4EBP1，導致其從eIF4E上解離，從而解除翻譯抑制，允許蛋白質合成繼續進行。4EBP1屬于翻譯抑制蛋白家族，在細胞生長、增殖和代謝調控中發揮重要作用。別稱包括：4E-BP1、BP-1、PHAS-I（胰島素調節的磷酸化熱酸穩定蛋白）。

四、儲存與穩定性

抗體以1000 ug/ml濃度提供于Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液（pH 7-8）中，含0.09%疊氮化鈉作為防腐劑。收到后應在2-8°C條件下儲存，避免冷凍。在此條件下，自收貨之日起可穩定保存1年。疊氮化鈉對某些細胞系具有毒性，如需用于活細胞實驗，請通過透析或脫鹽柱去除。

應用與推薦稀釋度

蛋白質印跡（WB）

推薦稀釋范圍：1:1000 - 1:6000

封閉與抗體稀釋液：5%脫脂牛奶-TBST

一抗孵育：過夜孵育（推薦4°C）

二抗推薦：山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）抗體（如A120-101P）

操作提示：建議根據樣本中4EBP1的表達豐度，在推薦范圍內優化稀釋倍數。對于高表達細胞系（如HeLa、HEK293），可使用較高稀釋度（如1:5000）；對于低表達樣本，可嘗試1:1000。

免疫組織化學（IHC）

推薦稀釋范圍：1:5000 - 1:20,000

抗原修復：推薦使用檸檬酸鹽緩沖液（pH 6.0）進行熱誘導抗原修復（FFPE組織切片）

操作提示：對于福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織切片，抗原修復是獲得最佳染色信號的關鍵步驟。建議在正式實驗前進行稀釋度梯度預實驗，以確定特定組織類型的最佳工作濃度。1:10,000為常見起始稀釋度。

五、生產與純化工藝

本抗體通過固定化固相載體上的4EBP1特異性表位進行親和純化。具體而言，識別表位定位于人4EBP1蛋白第75-118位殘基區域（參考序列NP_004086.1）。免疫球蛋白濃度采用比爾定律測定，設定1 mg/ml IgG在280 nm處吸光度為1.4。

六、注意事項

1. 防腐劑：緩沖液中含有0.09%疊氮化鈉，該化合物毒性較低但需注意實驗室安全規范。疊氮化鈉可能與二抗中的HRP反應，在使用HRP檢測系統前需充分洗脫。

2. 應用限制：產品僅限研究使用，不得用于診斷或治療程序。

3. 批次差異：不同批次的抗體濃度已標準化為1000 ug/ml，但建議收到新批次后驗證最佳工作稀釋度。

本產品在優化條件下可提供高特異性和靈敏度的4EBP1檢測結果，適用于研究mTORC1信號通路、翻譯調控以及相關疾病模型中的蛋白表達分析。