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特色產品一、產品概述
本文介紹的是由艾美捷Bethyl Laboratories推出的一款針對神經纖維蛋白1(Neurofibromin 1,NF1)的高親和力兔多克隆抗體(貨號:A300-140A)。該抗體適用于小鼠及人源樣本的免疫沉淀(IP)和免疫印跡(WB)檢測,由美國生產,采用抗原親和純化工藝制備,以完整IgG形式提供,未偶聯任何標記物。
神經纖維蛋白1由NF1基因編碼,是一種關鍵的Ras信號通路負調控因子。該基因的失活突變可導致1型神經纖維瘤?。∟F1),臨床表現為施萬細胞神經纖維瘤、牛奶咖啡斑及虹膜良性錯構瘤(Lisch結節)。因此,可靠的特異性抗體對于NF1相關基礎研究與臨床轉化具有重要意義。
二、產品詳細規格
參數 | 詳細信息
靶標 | Neurofibromin 1
反應種屬 | 小鼠、人
應用 | IP, WB
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形式 | 完整IgG
免疫原 | 第2789位至C端之間的區域
亞型 | IgG
偶聯物 | 未偶聯
純度 | 抗原親和純化
免疫原種屬 | 人
濃度 | 1000 ?g/ml
存儲條件 | 2 - 8 °C
有效期 | 收貨后1年
緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液,pH 7-8,含0.09%疊氮化鈉
三、抗原表位及生產信息
該抗體識別的人源神經纖維蛋白1表位位于第2760殘基至C端(第2818殘基)之間,參考序列號為NP_000258.1(GeneID 4763)。免疫原為第2789位至C端的區域。
純化工藝采用固相載體固定的表位特異性親和層析,確??贵w特異性。免疫球蛋白濃度通過比爾定律測定(1 mg/mL IgG在280 nm處的吸光度為1.4)。產品另提供A300-140A-T型號,其識別表位與A300-140A相同。
四、應用方法與推薦條件
4.1 免疫印跡(WB)
通用條件
所有WB實驗均采用含5%脫脂牛奶的TBST作為封閉液及抗體稀釋液。一抗孵育時間為過夜。
推薦稀釋比:1:1000 至 1:10,000
推薦凝膠:3-8% Tris-乙酸酯凝膠
檢測體系
細胞裂解液WB:使用山羊抗兔IgG(重鏈+輕鏈)二抗(貨號A120-101P)。
免疫沉淀產物WB:使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯二抗,封閉緩沖液中需添加5%正常豬血清(貨號S100-020)以降低背景。
4.2 免疫沉淀(IP)
推薦用量:6 ?g 抗體 / mg 蛋白裂解液
操作時請根據樣本總蛋白量換算所需抗體體積。由于抗體濃度為1000 ?g/ml,即6 ?g對應6 ?l抗體。
五、儲存與穩定性
未稀釋抗體應在2-8°C條件下儲存,切勿冷凍。自收貨之日起,在推薦條件下可穩定保存1年。緩沖液中含有0.09%疊氮化鈉作為防腐劑,使用前請注意實驗體系對疊氮化鈉的兼容性(如細胞實驗需透析去除)。
六、背景知識與功能意義
神經纖維蛋白1是由NF1基因編碼的大型細胞質蛋白,廣泛表達于神經系統等多種組織。其核心功能是通過GTP酶活化蛋白(GAP)結構域加速Ras-GTP水解為Ras-GDP,從而負向調控Ras介導的細胞增殖、分化和存活信號。
NF1失活的病理后果
當NF1發生雜合性失活突變時,細胞內活性Ras-GTP水平持續升高,驅動施萬細胞等異常增殖,最終形成神經纖維瘤。1型神經纖維瘤病為常染色體顯性遺傳病,發病率約1:3000,除腫瘤易感性外,患者還常伴有學習障礙、骨發育異常等。
七、研究應用價值
該抗體可識別靠近C端的表位(2760-2818),適用于檢測全長神經纖維蛋白1(分子量約220 kDa)及其C端截短突變體。在神經纖維瘤病機制研究、Ras信號通路分析以及藥物篩選模型中,該抗體可作為有效的檢測工具。

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