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Worthington:碳酸酐酶Carbonic Anhydrase的分子特性與生理作用

發布者:艾美捷科技    發布時間:2024-12-13     
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碳酸酐酶(CA)催化CO2/H2CO3的可逆水合和脫水反應。CA在自然界中廣泛存在,存在于動物、植物和某些細菌中。在哺乳動物中已經鑒定并表征了16種同工酶。由于紅細胞CA相對容易獲得用于實驗目的,因此它是研究最廣泛的。

51.png碳酸酐酶Carbonic Anhydrase

特異性:

血液中CO2的運輸和排泄在很大程度上依賴于紅細胞內CA對CO2反應的快速催化(Tufts等人2003年)。牛CA可逆地水合烷基丙酮酸酯,并對多種底物表現出水合酶活性(Pocker等人1974年,Wells等人1975年)。

 

組成:

迄今為止在哺乳動物中已描述了十六種CA同工酶。紅細胞CA,CA-I和CA-II最為知名。CA-I、CA-II、CA-III、CA-VII和CA-XIII是細胞質型的。CA-IV、CA-IX、CA-XII、CA-XIV和CA-XV是膜結合型的。CA-VI分泌在唾液中。CA-VA和CA-VB是線粒體的。還有三種無催化活性的形式,稱為CA相關蛋白(CARPs):CARP-VIII、CARP-X和CARP-XI(Coban等人2009年)。

 

鋅金屬總是與組氨酸93、95和118(成熟鏈編號)結合。一個氫鍵網絡,與鋅結合的水分子和這些組氨酸直接或間接相連,包括28-Ser、91-Glu、105-Glu、106-His、116-His、193-Tyr、198-Thr、208-Trp和223-Asn。這些殘基被發現是高度保守的(Lindskog1982年,Lindskog等人1984年)。牛和人的CA I和II包含一個獨特的C末端結結構,已被證明對酶活性和機械特性很重要(Alam等人2002年)。

 

分子特征:

紅細胞中的每種同工酶(CA-I和CA-II)由一個由259或260個氨基酸殘基組成的單鏈肽組成。低活性形式(CA-I)包含260個殘基,而高活性形式(CA-II)包含259個殘基。給定物種中紅細胞的高活性和低活性形式通常顯示出超過50%的序列同一性;例如,馬CA-I和CA-II形式僅顯示出55%的同一性(Wendorff等人1985年)。相比之下,不同物種中相同形式的同工酶顯示出更大的同源性;人的CA-II和牛CA-II顯示出77%的序列同源性(Tashian等人1980年,Engberg等人1985年,Alam等人2003年)。這些同工酶由不同的基因編碼,但由于在活性中心的大量同源性,它們似乎有共同的進化歷史。泛素,一個76個殘基的蛋白質,具有一些CA的酶特性,與CA有獨特的序列同源性(Deutsch1987年)。

 

碳酸酐酶的特性:

CATH分類

類別:Alpha Beta

拓撲:碳酸酐酶II

分子量:

29.0 kDa(理論)

30 kDa(Lindskog等人1971年)

最佳pH值:7.0-7.5(Demir等人2000年,Tasgin等人2009年)

等電點:6.40(理論)

 

艾美捷Worthington 碳酸酐酶(9001-03-0)的應用:

血液中CO2的測定

酸度測試試劑中CO2的消除

羧基轉移

還原反應

 

消光系數:

50,070 cm-1M-1(理論)

E1%, 280 = 19.0(Nyman和Lindskog1964年)

活性位點殘基

組氨酸(H63)

天冬氨酸(N66)

賴氨酸(K126)

 

激活劑:

HPO42-(Rowlett等人1991年)

SO32-(Rowlett等人1991年)

 

抑制劑:

單價陰離子(Lindskog等人1971年,Ward和Cull1972年)

磺酸鹽和磺胺類(Pocker和Watamori1973年,Binford等人1974年)

咪唑(Edsall1968年)

 

文獻參考:

Andersson, B. , Nyman, P. and Strid, L.

Amino Acid Sequence of Human Erythrocyte Carbonic Anhydrase B , Biochem Biophys Res Commun 48 , 670 , 1972

 

Appleton, D. and Sarkar, B.

The Activity-Related Ionization in Carbonic Anhydrase , Proc Natl Acad Sci U S A 71 , 1686 , 1974

 

Behravan, G. , Jonsson, B. and Lindskog, S.

Fine Tuning of the Catalytic Properties of Carbonic Anhydrase - Studies of a Thr200 --> His Variant of Human Isoenzyme II , Eur J Biochem 190 , 351 , 1990

 

Behravan, G. , Jonsson, B. and Lindskog, S.

Fine Tuning of the Catalytic properties of Human Carbonic Anhydrase-II-Effects of Varying Active-Site Residue-200 , Eur J Biochem 195 , 393 , 1991

 

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