GPX4熒光檢測試劑盒，促進細胞氧化應激研究

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）屬于谷胱甘肽過氧化物酶家族，該家族由八個成員（GPX1-8）組成。 GPX4的獨特之處在于它是家族中唯一的單體成員，并且可以在細胞膜中發揮作用。它通過防止膜脂質過氧化來對抗細胞氧化應激。哺乳動物的GPX4在其催化位點含有一個硒代半胱氨酸，這對于反應的發生至關重要，因此它是一種硒蛋白。在小鼠中敲除GPX4會導致胚胎致死，這表明其在細胞保護免受脂質過氧化氫損傷中具有獨特的作用，并且參與的途徑有限。GPX4功能障礙會導致脂質過氧化物的積累，最終導致鐵死亡（ferroptosis）細胞死亡。GPX4在癌細胞中含量較高，有助于對拉帕替尼、帕博西尼等抗癌藥物產生耐藥性。通過（1S,3R）-RSL3抑制GPX4可降低耐藥癌細胞的活性，并在小鼠模型中減少腫瘤體積。作為鐵死亡的關鍵調節因子和癌基因，GPX4是癌癥治療中的一個有前景的治療靶點。

GPX4熒光測定試劑盒是一種熒光測定法，旨在用于篩選和鑒定應用中測量谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）的活性。 該試劑盒采用便捷的96孔板格式，包含足夠的純化重組GPX4、谷胱甘肽、枯烯過氧化氫、NADPH、谷胱甘肽還原酶以及GPX4測定緩沖液，可供100次反應使用。

GPX4活性是通過間接方法測量的。 GPX4通過還原過氧化氫（ROOH）將還原型谷胱甘肽（GSH）轉化為氧化型谷胱甘肽（GSSG）。隨后，在NADPH存在的情況下，谷胱甘肽還原酶（GR）將GSSG還原為其還原形式，并將NADPH轉化為NADP?。NADPH本身具有熒光特性，而在氧化為NADP?時會失去這種特性。觀察到的熒光減少（激發波長=340 nm；發射波長=450 nm）與可供GR轉化的GSSG量以及GPX4活性成正比。

艾美捷BPS Bioscience-GPX4熒光檢測試劑盒：

貨號：82165

靶標：GPX4

儲存/穩定性：當按照指示儲存時，該測定試劑盒在收到之日起6個月內表現最佳。

應用：用于研究酶動力學，并在藥物發現和高通量篩選（HTS）應用中篩選小分子抑制劑。

運輸溫度：-80°C

禁忌：測定中DMSO的最終濃度不應超過1%。

警告：避免凍融循環。

科學分類：癌癥治療靶點

所需材料但未提供：

50% 乙醇

能夠在λ=340 nm激發并在λ=450 nm檢測發射光的微孔板熒光光度計

可調節微量移液器及無菌吸頭

僅供研究使用   

檢測結果示例：

圖：氯化汞（II）對GPX4活性的抑制作用。 在氯化汞（II）（Sigma #215465）的不同濃度存在下測量GPX4活性?！翱瞻住敝祻乃衅渌抵袦p去。結果以對照組的百分比表示（無抑制劑時的活性，設定為100%）。

文獻參考：

Zhang X., et al., 2020 J Cell Physiol 235 (4):3425-3437.

Lee J. and Roh J.-L., 2023 Cancer Letters 559: 216119.