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特色產品ALPCOc肽(小鼠)ELISA試劑盒(ALP-80-CPTMS-E01),是一種夾心型免疫測定法。96孔微孔板涂有C肽特異性單克隆抗體。將標準品、對照品和樣品加入到帶有共軛物的微孔板孔中。然后將微孔板在室溫下在微孔板振蕩器上以700-900rpm的速度孵育。第一次孵育完成后,用洗滌緩沖液洗滌細胞并吸干。加入TMB底物,在室溫下在微孔板振蕩器上以700-900rpm第二次孵育微孔板。第二次孵育完成后,加入終止溶液,用分光光度計在450nm處測量光密度(OD)。產生的顏色強度與樣品中C肽的量成正比。
ALPCO小鼠C肽ELISA用于定量測定小鼠血清中的C肽。
艾美捷ALPCO-c肽(小鼠)ELISA試劑盒所需材料:
- 用于分配高達100微升的精密移液管(帶一次性吸頭)
- 用于分配高達100微升的可重復或多通道移液管
- 用于試劑配制的容量瓶和移液管
- 用于試劑配制的蒸餾水或去離子水
- 微孔板洗滌器或洗滌瓶
- 能夠達到700-900轉/分鐘的微孔板振蕩器
- 帶有450納米濾光片的微孔板閱讀器
- 用于樣本制備的渦旋混合器。
注意事項:
1. 試劑盒中包含的人類血液產品已針對HIV(人類免疫缺陷病毒)、HBV(乙型肝炎病毒)和HCV(丙型肝炎病毒)的存在進行了檢測。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的絕對不存在;因此,所有試劑應被視為潛在的感染性物質。處理和處置應符合所有適當的國家和地方法規,以處理潛在的生物危害物質。
2. 所有來源于動物的材料均為BSE(牛海綿狀腦病)陰性。然而,所有材料應遠離反芻動物。
3. 避免與皮膚直接接觸。
4. 本產品不適用于內服。
5. 使用本產品時,避免進食、飲水或吸煙。
6. 不要使用嘴來移液任何試劑。
7. 試劑盒中的試劑是特定批次的,不得替代。
8. 不要使用超過有效期的試劑。
9. 不建議對測試程序進行變動,可能會影響測試結果。
儲存條件:
試劑盒應儲存在2-8°C的條件下。試劑盒在盒子標簽上的有效期之前是穩定的。
樣本處理:
血清樣本適用于本測定。不需要對樣本進行稀釋或處理。然而,如果樣本的C肽濃度高于最高標準,應將樣本稀釋在零標準中,并重復分析。建議1)在使用前徹底渦旋每個樣本,2)在不停頓的情況下進行移液操作。將C肽樣本分裝后存放在≤-20°C的條件下。樣本可以經歷多達4次凍融循環。
結果計算:
從標準品構建標準曲線。將零標準作為曲線的一部分進行繪制。建議使用軟件程序來計算標準曲線并確定樣本的濃度。小鼠C肽ELISA是一種配體結合測定,其反應與分析物濃度呈S形關系。目前公認的此類曲線的參考模型使用5參數邏輯(pl)擬合,因為這些模型能在更大范圍內優化準確性和精確度。盡管三次樣條和其他模型是可接受的方法,但它們通常在檢測范圍的低值和高值端顯示出較低的測定內準確性和精確度。在下面的例子中,使用了5參數pl曲線擬合來最大化低濃度樣本的準確性和精確度。然而,由于個別實驗室條件的影響,所有模型在可檢測范圍的最低和最高端的準確性和精確度都是有限的。因此,在解釋分析物響應變得非線性時的結果時,應始終謹慎。
短期測定方案:

文獻參考:
1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.

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