CD38環化酶活性抑制劑篩選檢測試劑盒：支持抑制劑高通量篩選與IC50測定

CD38（分化簇38，又稱環ADP核糖水解酶1）是一種跨膜糖蛋白和外切酶，在調節細胞內鈣離子穩態中發揮關鍵作用。CD38是多發性骨髓瘤（MM）細胞表面高度表達的抗原，而在正常淋巴和髓系細胞中表達水平較低，因此成為免疫治療極具吸引力的靶抗原。2015年，FDA批準了靶向CD38的單克隆抗體daratumumab（Darzalex） 用于治療多發性骨髓瘤，標志著CD38靶向療法的重大突破。此外，CD38的表達還與HIV感染、白血病及2型糖尿?。═2D）相關。近年來研究發現，肺癌患者中CD38的上調水平與患者生存率相關，其酶活性可促進細胞遷移、增殖及腫瘤進展。CD38也成為嵌合抗原受體T細胞（CAR-T）療法的熱門靶點，通過逆轉錄病毒轉導構建全人源CD38特異性CAR-T細胞，為CD38相關疾病（如肺癌）開辟了新的治療途徑。

CD38具有兩種酶活性：水解酶活性（水解NAD?生成ADPR）和環化酶活性（催化NAD?生成環ADPR）。其中，環化酶活性在調節細胞內鈣信號中尤為重要。為滿足科研人員在CD38環化酶活性抑制劑篩選及藥物發現中的需求，由艾美捷代理BPS Bioscience公司推出的CD38抑制劑篩選檢測試劑盒（環化酶活性）（貨號：71275） 提供了一套完整、靈敏、高通量兼容的解決方案。該試劑盒以96孔板格式為基礎，包含純化的重組人CD38酶（氨基酸43至C端）、特異性底物煙酰胺鳥嘌呤二核苷酸（NGD?）及優化緩沖液，支持100次酶反應，適用于環化酶活性的酶動力學研究及小分子抑制劑的高通量篩選（HTS）。

一、檢測原理：基于熒光法的環化酶活性測定

CD38的環化酶活性可催化NGD?（煙酰胺鳥嘌呤二核苷酸）生成環狀GDP-核糖（cGDPR）。與天然底物NAD?不同，NGD?被CD38環化后生成的cGDPR具有天然熒光特性（激發波長約300 nm，發射波長約410 nm）。因此，該試劑盒采用直接熒光檢測法：在反應體系中加入CD38酶和NGD?底物，酶催化反應生成熒光產物cGDPR，熒光強度與CD38環化酶活性成正比。當存在抑制劑時，酶活性被抑制，熒光信號降低。

這種“直接熒光”檢測模式具有以下優勢：

均相免洗：無需分離產物或添加額外檢測試劑，實現“加樣-混合-孵育-讀數”的簡便操作。

實時監測：可連續讀取熒光值，獲取酶反應的初始速率，用于精確的動力學分析。

成本效益高：無需標記抗體或酶聯檢測試劑，降低單次實驗成本。

二、試劑盒核心組分與設計優勢

1. 即用型完整組分，操作高效

試劑盒提供所有必需成分：

純化的重組人CD38酶（氨基酸43至C端）：保留完整的環化酶活性，無標簽干擾。

熒光底物NGD?：特異性檢測環化酶活性，背景熒光極低。

CD38檢測緩沖液：優化pH和離子組成，確保酶反應在最適條件下進行。

96孔微孔板（可選，部分規格包含）。

詳細的實驗操作說明書。

2. 支持酶動力學與抑制劑IC50測定

利用該試劑盒，研究人員可以：

測定酶動力學參數：通過改變NGD?底物濃度，計算CD38環化酶的Km、Vmax和kcat/Km，比較不同突變體或不同條件下的催化效率。

篩選小分子抑制劑：在固定酶和底物濃度下，加入梯度稀釋的待測化合物，孵育后讀取熒光值，計算抑制率并擬合IC50曲線。

高通量篩選（HTS）：96孔板格式兼容自動化移液工作站，可在單次實驗中完成數百個化合物的初篩。

3. 陽性對照建議

雖然試劑盒本身不提供陽性對照抑制劑，但文獻中已知的CD38環化酶抑制劑（如kuromanin、apigenin等）可作為陽性對照。建議用戶自行準備已知抑制劑，以驗證實驗體系的可靠性。BPS Bioscience也可提供推薦對照品（需另行購買）。

三、應用場景與科研價值

1. 多發性骨髓瘤藥物篩選

Daratumumab的成功證實了CD38靶向治療的臨床價值。然而，單克隆抗體成本高、需注射給藥，且部分患者產生耐藥。小分子CD38環化酶抑制劑可作為替代或聯合治療策略。利用該試劑盒，可快速篩選能夠抑制CD38環化酶活性的小分子化合物，為開發口服CD38抑制劑提供先導化合物。

2. 肺癌及其他實體瘤研究

研究表明，CD38在肺癌患者中的上調與不良預后相關，其環化酶活性通過調節細胞內鈣信號促進腫瘤細胞遷移、增殖和轉移。利用該試劑盒，可以評估候選化合物對肺癌細胞中CD38環化酶活性的抑制效果，為開發新型肺癌治療藥物提供實驗依據。此外，該試劑盒也適用于其他CD38相關實體瘤（如前列腺癌、胰腺癌）的藥物篩選。

3. 自身免疫病及炎癥疾病

CD38在調節性T細胞（Treg）和髓系抑制細胞（MDSC）中的表達與免疫抑制功能相關。通過篩選CD38環化酶抑制劑，可能恢復抗腫瘤免疫或減輕自身免疫病理。該試劑盒可用于評估免疫調節劑對CD38酶活性的影響，拓展CD38靶點的應用范圍。

4. 酶學機制與結構生物學研究

純化的重組CD38酶和特異性NGD?底物為結構生物學研究提供了理想工具。通過測定不同突變體的酶活性，可以定位CD38環化酶活性中心的關鍵氨基酸殘基，為理性藥物設計提供結構基礎。

五、產品數據

六、文獻參考

Cui Q., et al., 2021 J Hematol Oncol. 14(1):82.

Gao L., et al., 2021 Cell Death Dis. 12(7):680.