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特色產品在免疫熒光檢測技術發展的漫長歷程中，異硫氰酸熒光素（FITC）標記的抗體無疑扮演了奠基者的角色。作為最早被廣泛應用的熒光染料之一，FITC以其成熟的工藝和穩定的性能，至今仍在許多實驗室中發揮著作用。本文將詳細介紹FITC標記驢抗兔IgG(H+L)多克隆抗體（貨號：711-095-152）這一經典次級抗體的核心特性、應用方案及其在當代研究中的定位。
Jackson 總部位于美國賓夕法尼的蘭卡斯特，距離費城大概有40英里。Jackson在1982年由科學家展開了包括在細胞生物學，蛋白質化學，微生物學，免疫學及產品開發實驗研究。 Jackson產品僅用于研究，不用于診斷或治療用途。作為美國各種二抗生產公司之一，Jackson在各國設有幾十家代理。由于其產品效價 高、種類全、價格低廉，因而成為各大藥廠、試劑盒生產廠、大型實驗室采購此類試劑的優選。其產品主要包括：各種純化的二抗、標記的二抗（AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、長臂生物素、辣根酶和堿磷酶標記）等。
一、抗體核心特性：高特異性與廣泛反應性
本品為源自驢宿主的多克隆抗體，其靶標為兔源性免疫球蛋白G?？贵w形式為全分子IgG，意味著其保留了完整的抗體結構——包含一個Fc片段和兩個通過二硫鍵連接的抗原結合Fab片段，形成分子量約為160kDa的二價結構。這種完整結構使其具備更高的抗原結合親合力，適用于絕大多數免疫檢測實驗，并且因其制備工藝成熟而具有顯著的成本優勢。
其特異性被定義為IgG(H+L)。這表明它不僅能識別兔IgG分子的重鏈，也能與其輕鏈結合。由于同一物種內不同類別免疫球蛋白（如IgM、IgA等）共享相同或相似的輕鏈，因此該抗體能夠與兔的各種IgG亞類以及其他兔免疫球蛋白發生反應，確保了檢測的全面性。
本品格外突出的優勢之一在于其經過嚴格處理的最小交叉反應性。通過ELISA和/或固相吸附測試，已證實該抗體與牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉鼠、馬、人、小鼠、大鼠和綿羊的血清蛋白發生交叉反應的風險極低。這一特性對于在復雜組織樣本（如包含多種細胞或血清成分的樣本）中進行實驗的研究者至關重要，它能有效避免由非特異性結合導致的高背景，從而獲得更清晰、更可靠的特異性信號。當然，產品說明也提示，它仍有可能與未列出的其他物種免疫球蛋白發生交叉反應。
二、制備工藝與穩定保存方案
該抗體通過免疫親和層析技術進行純化，從抗血清中特異性分離出目標抗體，確保了產品的高純度與高活性。產品以凍干粉形式提供，應在2-8°C下干燥保存。
使用前，需按照產品說明書加入指定體積的去離子水進行重懸。若溶液不夠澄清，建議進行離心處理。重懸后的液體在2-8°C下可作為原液穩定保存約6周。
對于長期保存，推薦以下兩種策略：
1.分裝深凍：將重懸后的抗體分裝至小管中，于-70°C或更低的溫度下冷凍保存，并嚴格避免反復凍融。
2.甘油保存：在抗體原液中加入等體積的甘油（最終濃度為50%），然后以液體形態儲存于-20°C。
自重新水化之日起，產品的有效期為一年。若經性能測試驗證合格，此有效期可酌情延長。產品的基礎緩沖體系為pH7.6的0.01M磷酸鈉和0.25MNaCl，并含有15mg/ml的無IgG、無蛋白酶牛血清白蛋白作為穩定劑，以及0.05%的疊氮鈉作為防腐劑。
三、熒光標記：FITC的性能分析與應用考量
本品所使用的標記物是異硫氰酸熒光素（FITC）。其最大激發波長和最大發射波長分別為492nm和520nm，是典型的綠色熒光信號。
作為歷史最悠久的熒光標記物之一，FITC的主要優勢在于其技術成熟、成本相對較低，并且擁有大量的歷史數據可供參考。然而，與新一代的綠色熒光染料（如AlexaFluor?488）相比，FITC也存在一些固有的局限性：
亮度較低：在相同條件下，FITC的熒光強度通常不及AlexaFluor?488。
光穩定性差：FITC在光照下容易發生光漂白，導致熒光信號迅速衰減，這給拍照和觀察，特別是需要長時間曝光的實驗帶來了挑戰。為了緩解此問題，強烈建議在封片時使用含有抗熒光淬滅劑的封片劑。
因此，在產品說明中，制造商明確建議，對于許多原本計劃使用FITC的應用，AlexaFluor?488是更優的選擇，因為它更亮、更耐光漂白，且對pH變化的敏感性更低。
四、使用建議與實驗優化
產品給出的建議工作稀釋度范圍是1:50至1:200。這個起始范圍相較于其他一些熒光標記的抗體要更濃一些，可能與FITC本身的熒光效率有關。然而，必須明確指出，這僅是一個推薦的起始點，最佳的稀釋倍數必須通過使用者自身的實驗體系進行嚴謹的經驗性確定。
影響最終工作濃度的因素繁多，主要包括：
抗原密度：目標蛋白在樣本中的表達水平。
樣本類型與固定方式：不同的樣本處理方式會影響抗體的滲透性與結合效率。
信號檢測設備的靈敏度。469篇文獻中被引用
五、熱門產品
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211-032-171 | 過氧化物酶偶聯 IgG 組分單克隆小鼠抗兔 IgG，輕鏈特異性（min x bov，gt，arm hms，hrs，胡，ms，大鼠，shp ig） |
111-605-003 | Alexa Fluor 647 偶聯 AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L） |
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115-115-164 | R-藻紅蛋白偶聯 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG（亞類 1+2a+2b+3），Fcγ 片段特異性（min x 胡，Bov，Rb Sr Prot） |
109-005-097 | AffiniPure 山羊抗人 IgG，F（ab'）2 片段特異性（最小 X Bov，小時，Ms Sr Prot） |
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