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特色產品在免疫組織化學、免疫熒光及ELISA等免疫檢測技術中,獲得高信噪比的清晰結果至關重要。非特異性背景信號是困擾許多研究者的常見問題,其來源包括蛋白質的非特異性吸附、抗體間的非目標結合,以及組織細胞表面Fc受體的干擾。為了解決這一問題,使用封閉血清已成為實驗流程中不可或缺的關鍵步驟。其中,正常山羊血清(貨號:005-000-121)作為一種高效、特異的封閉試劑,在科研實驗中廣泛應用。
Jackson 總部位于美國賓夕法尼的蘭卡斯特,距離費城大概有40英里。Jackson在1982年由科學家展開了包括在細胞生物學,蛋白質化學,微生物學,免疫學及產品開發實驗研究。 Jackson產品僅用于研究,不用于診斷或治療用途。作為美國各種二抗生產公司之一,Jackson在各國設有幾十家代理。由于其產品效價 高、種類全、價格低廉,因而成為各大藥廠、試劑盒生產廠、大型實驗室采購此類試劑的優選選。其產品主要包括:各種純化的二抗、標記的二抗(AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、長臂生物素、辣根酶和堿磷酶標記)等。

一、產品特性與制備工藝
正常山羊血清,顧名思義,是來源于健康山羊的未免疫血清。本品為未標記的原態血清,經過一系列嚴謹的工藝處理,以確保其純凈度與穩定性。首先,血清經過脂質提取處理,這不僅能提高溶液的澄清度,減少潛在雜質,也有助于降低因脂質引起的非特異性背景。隨后,產品被置于含有疊氮鈉的磷酸鹽緩沖液中進行透析,最終以凍干固體的形式提供。這種形式極大地方便了運輸與長期儲存,同時保持了血清中各種生物成分的天然活性。
二、核心功能:作為封閉試劑的應用原理
該血清的核心價值在于其作為封閉試劑的卓越性能。建議將重懸后的血清用PBS稀釋至5%(v/v)的濃度,用于實驗樣本的封閉。
其發揮作用的機理主要基于以下幾點:
1.占據非特異性結合位點:在包被了抗原的固相載體或組織切片上,存在著許多未被特異性抗原覆蓋的區域。正常山羊血清中的大量無關蛋白質可以優先占據這些位點,從而阻止后續加入的檢測抗體通過疏水作用或離子相互作用非特異性地吸附在這些區域,有效降低背景染色。
2.阻斷Fc受體:許多細胞(如免疫細胞、內皮細胞)表面表達Fc受體,它們能夠與抗體分子的Fc段結合。如果使用羊源性一抗或二抗,正常山羊血清中的天然免疫球蛋白可以封閉樣本中可能存在的抗羊Fc受體,防止檢測抗體通過Fc-Fc受體的相互作用非特異性地結合到細胞上。
3.中和無關干擾:血清中含有多種生物分子,可以中和樣本中可能存在的其他非特異性干擾因素。
一個至關重要的建議是:為了達到最佳的封閉效果,應選擇與標記抗體來源宿主相同的正常血清。例如,若實驗中使用的是驢源性的標記二抗,那么最優的選擇是正常驢血清進行封閉。這是因為同源血清能最有效地提供與標記抗體最相似的干擾蛋白譜,從而實現最精準的封閉。封閉通常作為一個獨立的孵育步驟,在加入一抗之前進行。
三、使用、保存與操作指南
本品為凍干粉形態,應在2-8°C下干燥保存。使用前,需按照產品說明書加入指定體積的去離子水進行重懸。若溶液不夠澄清,建議進行離心處理。重懸后的液體即為100%濃度的血清,在2-8°C下可穩定保存約6周。
對于更長期的保存,建議將重懸后的未稀釋產品進行分裝,并于-20°C或更低的溫度下冷凍保存,并嚴格避免反復凍融,以維持血清中蛋白質的活性。
自重新水化之日起,產品的有效期為一年。若經性能測試驗證,其封閉效果仍符合實驗要求,則有效期可酌情延長。產品中含有0.05%的疊氮鈉作為防腐劑,以抑制微生物生長。
四、工作濃度建議
對于封閉用途,標準操作是使用5%(v/v)的工作液。這可以通過將重懸后的100%血清進行1:20稀釋(例如,50微升血清加入950微升PBS)輕松實現。當然,針對特定的實驗體系(如某些背景較高的組織),可嘗試在3%至10%的濃度范圍內進行微調,以找到最優條件。
五、熱門產品
017-000-121 | 正常驢血清 |
209-005-098 | AffiniPure小鼠抗人IgG Fcγ片段特異性抗體(已吸附牛、馬、小鼠血清蛋白) |
211-032-171 | 過氧化物酶標記小鼠抗兔IgG輕鏈特異性單克隆抗體 |
111-095-144 | FITC標記AffiniPure山羊抗兔IgG(H+L)抗體 |
115-035-209 | AffiniPure山羊抗小鼠IgG (Fcγ亞類3特異性)抗體 |
115-035-208 | 辣根過氧化物酶標記AffiniPure山羊抗小鼠IgG (Fcγ亞類2c特異性) 抗體 |
115-035-207 | 過氧化物酶偶聯 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG,Fcγ 亞類 2b 特異性(最小 X 胡,Bov,Rb Sr Prot) |
115-035-206 | 過氧化物酶偶聯 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG,Fcγ 亞類 2a 特異性(最小 X 胡,Bov,Rb Sr Prot) |
115-035-205 | 過氧化物酶偶聯的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG,Fcγ 亞類 1 特異性(最小 X 胡,Bov,Rb Sr Prot) |
115-545-003 | AlexaFluor488標記山羊抗小鼠IgG(H+L)多克隆抗體 |
112-545-003 | Alexa Fluor 488 偶聯 AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L) |
200-002-156 | IgG組分單克隆小鼠抗地高辛 |
016-030-084 | 過氧化物酶鏈霉親和素 |
715-545-150 | AlexaFluor488標記驢抗小鼠IgG(H+L)多克隆抗體 |
711-545-152 | Alexa Fluor 488 偶聯 AffiniPure 驢抗兔 IgG (H+L)(最小 X Bov,Ck,Gt,GP,Sy Hms,Hrs,胡,Ms,大鼠,Shp Sr Prot) |
711-165-152 | Cy3 偶聯 AffiniPure 驢抗兔 IgG(H+L)(最小 X Bov,Ck,Gt,GP,Sy Hms,Hrs,胡,Ms,大鼠,Shp Sr Prot) |
005-000-121 | 正常山羊血清 |
115-585-003 | Alexa Fluor 594 偶聯 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L) |
111-585-003 | Alexa Fluor 594 偶聯 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L) |
艾美捷科技是Jackson的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
http://www.zihai029.com/products/005-000-121.shtml

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