IBL-人β淀粉樣蛋白毒性寡聚物檢測試劑盒檢測結果計算方案

淀粉樣β（淀粉樣β）42寡聚被認為是阿爾茨海默?。ˋD）的早期事件。Irie等人通過系統脯氨酸掃描和固態核磁共振研究提出了他們的假設，即淀粉樣β42聚集時在22和23位具有轉彎結構的淀粉樣β構象具有很高的毒性，也容易形成寡聚體。1）人們認為，有毒的淀粉樣貝塔構象是穩定的，很容易形成神經毒性寡聚物。該抗體（克隆：24B3）特異性檢測有毒的淀粉樣蛋白β構象，用于開發ELISA檢測試劑盒。2）該試劑盒可以選擇性地測量腦脊液中推測的淀粉樣肽β低聚物。

艾美捷IBL-人β淀粉樣蛋白毒性寡聚物檢測試劑盒：

貨號：27709-96Well

預期用途：研究用試劑

檢測方法：酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

標記物：辣根過氧化物酶（HRP）

適用物種：人類

檢測樣本類型：腦脊液（CSF）

檢測范圍：3.13 ~ 200 pg/mL

第一步反應條件：2 - 8 ℃ 孵育過夜

第二步反應條件：2 - 8 ℃ 孵育60分鐘

靈敏度：0.27 pg/mL

化合物交叉反應性如下：

人 Aβ (1-40)：≦0.1%

人 Aβ (1-42)：≦0.1%

儲存條件：2 - 8 ℃

檢測服務：可提供

包裝規格：96孔板 × 1

試劑盒組成：

1. 預包被板：（抗人Aβ（N）（82E1）小鼠IgG抗體）96孔 × 1  

2. 標記抗體濃縮液：（30×）HRP標記抗AβE22P 24B3小鼠IgG Fab’ 0.4 mL × 1  

3. 標準品：（E22P-Aβ40二聚體）0.5 mL × 2  

4. EIA緩沖液 30 mL × 1  

5. 標記抗體稀釋液 12 mL × 1  

6. 顯色底物：TMB溶液 15 mL × 1  

7. 終止液 12 mL × 1  

8. 洗滌緩沖液濃縮液 50 mL × 1  

檢測原理：

本試劑盒采用固相夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）。預包被板上固定有捕獲抗體，樣本和標準品加入孔中進行第一步反應。反應后，加入HRP標記的檢測抗體進行第二步反應。洗滌去除未結合的抗體后，加入四甲基聯苯胺（TMB）顯色底物，顯色強度與目標分子的含量成正比。

操作注意事項：

1. 樣本應在采集后盡快檢測。如需儲存，請冷凍保存，避免反復凍融。解凍時應在低溫下進行，并在檢測前充分混勻。  

2. 樣本應使用本試劑盒中的“4號 EIA緩沖液”進行稀釋。  

3. 建議對樣本和標準品進行重復檢測。  

4. 每次實驗都應繪制標準曲線。  

5. 樣本應保持在中性pH范圍內，有機溶劑的污染可能會影響檢測結果。  

6. 所有試劑在使用前應恢復至室溫，并輕輕充分混勻?；靹蚝笳埓_認試劑質量無變化。  

7. 洗滌預包被板時，請僅使用本試劑盒提供的“8號 洗滌緩沖液濃縮液”。洗滌不充分可能導致檢測失敗。  

8. 若使用洗瓶，請將洗滌緩沖液注滿每個孔，倒置板子并輕輕甩動，確保液體完全排出。請按說明書重復洗滌步驟，避免洗滌不徹底。  

9. 去除洗滌緩沖液后，請將板子輕叩在干凈的紙巾上，確保孔內液體完全去除，注意紙巾不要接觸孔內壁。  

10. “6號 顯色底物（TMB溶液）”對光敏感，應避光保存，并避免與金屬接觸。每次使用時應按需取量，放入干凈的容器中。  

11. 加入TMB溶液后，孔內液體逐漸變為藍色。在此過程中，板子應避光保存。收集容器中剩余的TMB溶液不得倒回原瓶，以免污染。  

12. 加入“7號 終止液”后，應在30分鐘內完成吸光度（O.D.）測定。

檢測結果計算方法：

1. 以標準品的濃度為橫軸，吸光度（O.D.）為縱軸，繪制標準曲線?？墒褂眠m當的回歸曲線（如雙對數轉換的二次回歸）擬合各點。  

2. 根據標準曲線，讀取待測樣本的吸光度對應的濃度值。  

3. 將讀取的濃度值乘以樣本的稀釋倍數，計算最終濃度。