Abbexa：Mouse D-Dimer ELISA Kit

文獻標題：Organ Uptake, Toxicity and Skin Clearance of Ruthenium Contrast Agents Monitored In Vivo by X-Ray Fluorescence

DOI：https://doi.org/10.2217/nnm-2023-0061

研究背景：關于納米材料在醫學成像領域中作為對比劑的快速發展和應用。隨著納米科技的進步，納米粒子（NPs）已經被設計并用于生物醫學成像，以提高成像技術的靈敏度和分辨率。釕（Ru）作為一種具有獨特物理化學性質的金屬，被用于開發納米粒子，這些納米粒子可以作為對比增強劑，用于磁共振成像（MRI）、正電子發射斷層掃描（PET）、單光子發射計算機斷層掃描（SPECT）和計算機斷層掃描（CT）等成像技術。

研究背景強調了理解納米粒子在生物體內的分布、代謝和宿主反應的重要性，這對于確保這些新型對比劑的安全性和生物相容性至關重要。納米粒子的行為會受到其物理化學屬性（如材料組成、大小、形狀、表面特性）的影響，這些屬性可以通過化學合成進行調整。當納米粒子進入生物體液時，它們會吸附生物分子，形成影響納米粒子代謝和與免疫細胞相互作用的冠層。

此外，研究背景還提到了金屬基納米粒子在納米醫學中的吸引力，包括它們作為成像對比增強劑、藥物載體和治療劑的潛力。為了實現這些應用，必須深入理解納米粒子在生物體內的動態行為，包括它們如何在主要器官（如肝臟、脾臟和腎臟）中積累、被吞噬，并最終被代謝和/或排泄。這項研究的目的是探索釕納米粒子在小鼠體內的分布、毒性和皮膚清除情況，以期為未來的納米醫學應用提供科學依據。

研究內容：

這項研究的核心內容是調查通過靜脈注射進入小鼠體內的釕納米粒子（Ru NPs）的分布、毒性和皮膚清除情況。研究團隊旨在了解這些納米粒子在體內的生物分布，它們如何影響器官（特別是肝臟和脾臟），以及它們是否可以通過皮膚排出體外。這項研究對于評估Ru NPs作為X射線熒光（XRF）成像對比劑的潛力和安全性至關重要。

研究方法：

1. 納米粒子合成與表征：使用聚維酮（PVP）作為穩定劑，通過化學合成方法制備了Ru NPs。通過透射電子顯微鏡（TEM）確定了納米粒子的大小和形態。使用動態光散射（DLS）和ζ電位測量評估了納米粒子的水動力學大小和表面電荷。通過電感耦合等離子體發射光譜（ICP-OES）測定了Ru NPs的濃度。

2. 動物實驗：使用7周齡的雌性裸鼠（NMRI-Foxn1nu/nu）進行實驗。小鼠被分為兩組，分別靜脈注射1% w/v（40 mg/kg體重）和0.5% w/v（20 mg/kg體重）的Ru NPs。在注射后的1小時、24小時、72小時和2周內對小鼠進行XRF成像。

3. XRF成像：使用實驗室設置的XRF成像系統，對注射Ru NPs的小鼠進行全身成像。不同的時間點（注射后1小時、24小時、72小時和2周）收集XRF投影圖像。血漿D-二聚體濃度定量：收集Ru NPs處理小鼠的血樣，并使用競爭性酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定血漿中D-二聚體的濃度。

4. 組織病理學和免疫組織化學：在實驗結束時（72小時或2周），對小鼠的主要器官（肺、肝、脾、腎和皮膚）進行解剖、固定、包埋和切片。使用蘇木精-伊紅（H&E）染色和F4/80抗體進行免疫熒光（IF）染色，評估組織形態和巨噬細胞的存在。

5. 基因表達研究：從切除的器官中提取RNA，并使用定制的qRT-PCR陣列評估與炎癥、氧化應激和凋亡相關的29個基因的表達。

通過這些方法，研究團隊能夠詳細分析Ru NPs在小鼠體內的分布、它們對器官的潛在毒性以及它們如何被機體清除，特別是通過皮膚。這些信息對于評估Ru NPs作為醫學成像對比劑的安全性和有效性至關重要。

在文獻中，Mouse D-Dimer ELISA Kit（貨號：abx258705）的主要應用是定量檢測小鼠血漿中D-二聚體（D-dimer）的濃度。D-二聚體是交聯纖維蛋白特異性降解產物，其在血漿中水平的升高通常與血栓形成和纖溶活性增加相關。在這項研究中，研究者通過以下步驟使用ELISA Kit來評估Ru NPs對小鼠凝血系統的影響：

1．樣本收集：在Ru NPs給藥前以及給藥后1小時、72小時和2周時，從Ru NPs處理的小鼠（n = 5）和未處理的小鼠（作為對照）收集血液樣本。

2．血漿分離：從收集的血液樣本中分離出血漿。

3．D-二聚體測定：使用Mouse D-Dimer ELISA Kit按照制造商的說明書進行操作，定量檢測分離出的血漿樣本中D-二聚體的濃度。

4．數據分析：將Ru NPs處理小鼠的血漿中D-二聚體濃度與對照組小鼠的濃度進行比較，以評估Ru NPs是否引起了凝血系統的激活。

通過這種方法，研究者能夠檢測Ru NPs注射后小鼠體內是否發生了血管內凝血和血栓形成，這對于評估Ru NPs的血管毒性和血栓形成潛力至關重要。ELISA Kit提供了一種敏感和特異的手段來監測與納米粒子暴露相關的凝血級聯反應的變化。