BMA Biomedicals：小鼠MHC II類單克隆抗體

解析文章：《The Potential of Bone Marrow-Derived Cells to Differentiate to Glomerular Mesangial Cells》

鏈接： https://journals.lww.com/jasn/fulltext/2001/07000/the_potential_of_bone_marrow_derived_cells_to.9.aspx

一、背景

骨髓干細胞（BMC）的分化潛力：

骨髓干細胞傳統上被認為主要能分化為造血系和血管間充質細胞系，但關于其是否能分化為腎小球細胞的研究較少。一些腎小球疾病的根本發病機制可能與骨髓干細胞的異常有關，這一發現為通過骨髓移植（BMT）治療相關疾病提供了理論基礎。

研究目的：

探討骨髓干細胞是否有可能分化為腎小球系膜細胞，進而為腎小球疾病的治療提供新的思路和方法。

二、 方法

實驗動物與分組：

使用同基因C57BL/6j（B6）小鼠作為受體，轉基因表達綠色熒光蛋白（GFP）的B6小鼠作為供體。受體小鼠經過致死劑量的全身照射后，移植來自供體小鼠的骨髓干細胞。

骨髓移植與細胞處理：

供體小鼠的骨髓干細胞在移植前進行T細胞清除處理，并通過尾靜脈注射到受體小鼠體內。受體小鼠在移植后不同時間點（2周、4周、8周、24周）進行腎臟組織學分析和流式細胞術檢測。

組織學與免疫組化分析：

腎臟組織經過固定、包埋、切片后，進行PAS染色和免疫組化染色，檢測GFP陽性細胞在腎小球內的分布和類型。

使用特異性抗體（如抗desmin抗體）標記系膜細胞，同時用F4/80抗體標記巨噬細胞，用Thy-1抗體標記T細胞，以區分GFP陽性細胞的類型。

MHC Class II 抗體的應用：

在本研究中，使用了BMA Biomedicals品牌的MHC Class II 抗體（貨號：T-2106，Clone ER-TR3）來檢測腎小球內浸潤的免疫細胞是否表達MHC Class II分子。這一抗體對于識別抗原呈遞細胞（如樹突狀細胞、巨噬細胞和活化的T細胞）具有重要意義。

通過與GFP陽性細胞的共定位分析，進一步確認了GFP陽性細胞并非活化的免疫細胞，而是可能來源于供體骨髓干細胞的系膜細胞。

三、 實驗結果

骨髓干細胞的植入與分化：

流式細胞術結果顯示，受體小鼠的脾臟淋巴細胞和骨髓細胞在移植后逐漸被供體來源的GFP陽性細胞替代。

組織學分析表明，從移植后4周開始，GFP陽性細胞在腎小球內逐漸增多，且主要位于系膜區。

免疫組化染色顯示，部分desmin陽性的系膜細胞同時表達GFP，證實了骨髓干細胞可以分化為系膜細胞。

GFP陽性細胞的性質：

GFP陽性細胞在腎小球內并非巨噬細胞或T細胞，因為它們不表達F4/80或Thy-1抗原，且僅少數GFP陽性細胞表達巨噬細胞清道夫受體或MHC Class II分子。

體外培養的腎小球細胞實驗進一步證實了GFP陽性細胞具有系膜細胞的特征，如表達desmin和對血管緊張素II（AngII）刺激的收縮反應。

四、結論與討論

骨髓干細胞分化為系膜細胞的潛力：

本研究首次證明了骨髓干細胞具有分化為腎小球系膜細胞的潛力，這一發現為腎小球疾病的發病機制提供了新的視角。

骨髓干細胞可能通過替代受損的系膜細胞或促進系膜細胞的再生來減輕腎小球損傷，為骨髓移植治療腎小球疾病提供了理論依據。

MHC Class II 抗體的應用前景：

MHC Class II 抗體的使用不僅有助于區分GFP陽性細胞是否為活化的免疫細胞，還為進一步研究腎小球內免疫細胞亞群及其功能提供了有力工具。

在未來的研究中，該抗體可用于監測腎小球疾病中免疫細胞的浸潤情況，評估疾病活動度和治療效果。

臨床與科研意義：

骨髓干細胞在腎小球疾病治療中的應用前景廣闊，未來的研究應聚焦于優化骨髓移植方案、探索骨髓干細胞分化的具體機制以及評估其在不同腎小球疾病模型中的療效。同時，MHC Class II 抗體的廣泛應用將為腎小球疾病的免疫病理學研究提供新的思路和方法。

五、 未來研究方向

進一步研究骨髓干細胞分化為系膜細胞的具體分子機制和調控因素。探索不同疾病模型下骨髓移植的治療效果及安全性。評估骨髓干細胞移植與其他治療方法的聯合應用效果。深入研究MHC Class II 抗體在腎小球疾病中的免疫監測和療效評估中的作用。

BMA Biomedicals品牌Monoclonal Antibody To Mouse MHC Class II

小鼠MHC II類單克隆抗體（貨號：T-2106）

單克隆抗體ER-TR3：研究T輔助細胞的重要工具

單克隆抗體ER-TR3是ER-TR系列單克隆抗體（包括ER-TR3、ER-TR2、ER-TR1）中的一員，它們能夠識別由小鼠H-2復合體中的Ia區域編碼的MHC II類抗原，該區域在人類中對應于HLA-DR區域。這些抗體是研究T輔助細胞與II類抗原呈遞細胞（包括樹突狀細胞、B細胞和巨噬細胞）相互作用的重要工具。通過這些抗體，研究人員能夠更深入地了解這些細胞間復雜的相互作用機制。

此外，由于ER-TR3等抗體還能夠標記胸腺中的基質細胞，因此它們也為研究T輔助細胞的發育提供了新的可能性。胸腺是T細胞發育的主要場所，基質細胞在其中扮演著關鍵角色，通過分泌細胞因子和提供適當的微環境來支持T細胞的發育和分化。因此，ER-TR3等抗體不僅有助于揭示T輔助細胞與抗原呈遞細胞間的相互作用，還能夠探索T輔助細胞在胸腺中的發育過程。

綜上所述，單克隆抗體ER-TR3是研究T輔助細胞功能及其發育過程的重要工具，為免疫學領域的研究提供了有力的支持。

Product number: T-2106

Host species: Rat IgG2b

Clone: ER-TR3

Quantity: 150 ug

Format: Affinity purified, lyophilized

Reconstitute by adding 0.5ml distilled water. This stock solution contains 0.3mg/ml IgG, phosphate buffered saline pH 7.2 (PBS), 5mg/ml bovine serum albumin (BSA) as a stabilizer and 0.09% sodium azide as a preservative.

Shelf-life: Original vial: 1 year at 4° - 8°C

Stock solution: 1 year at -20°C. Avoid repeated thawing and freezing.

Applications:Tested for immunohistochemistry (IHC); has been described to work in FACS.

Approximate working dilution for IHC:

Frozen sections: 1.5g/ml (1:200)

Paraffin sections: does not react on routinely processed paraffin sections.

Optimal dilutions should be determined by the end user.

Suggested positive control: Mouse spleen.

Immunogen: Murine thymic reticulum.

Antigen, epitope: MHC Class II antigens are heterodimers consisting of one-chain (31-34kDa) and one-chain (26-29kDa). The epitope has not been further characterized.

Antigen distribution

Isolated cells: The antigen is found on dendritic cells, B-cells and macrophages. The level of antigen detected by ER-TR1,ER-TR2 and ER-TR3 differs from strain to strain (see table below).

Tissue Sections: The antigen is found on B-cells, interdigitating cells and macrophages in peripheral lymphoid organs but is absent from T-cells. It is also expressed as a fine reticular pattern on stromal thymic cells of the cortex and as a

confluent pattern on stromal thymic cells of the medulla.

Specificity:

Mouse: cells expressing MHC class II antigens

Other species: negative on human, other unknown

Selected references：

Van Vliet, E., et al.: Monoclonal Antibodies to Stromal Cell Types of the Mouse Thymus. Eur. J. Immunol. 14, 524-529 (1984)

Van Vliet, E., et al.: Stromal Cell Types in the Developing Thymus of the Normal and Nude Mouse Embryo. Eur. J. Immunol. 15, 675-681 (1985)