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品牌專題DNA損傷是細胞基因組不穩定的核心誘因,與癌癥發生、衰老及遺傳性疾病密切相關。當細胞暴露于輻射、化療藥物或環境毒素時,DNA雙鏈斷裂(DSB)是最致命的損傷類型,可導致染色體畸變和細胞凋亡。研究DNA損傷的修復機制對理解腫瘤耐藥性、開發靶向療法至關重要。例如,肺癌患者中DNA損傷修復(DDR)基因突變顯著影響預后和靶向治療響應[39],而放療的療效直接依賴于細胞對DSB的修復能力。
γH2AX(磷酸化組蛋白H2AX)是DSB的最早期、最特異的分子標志物。DSB激活ATM/ATR激酶,觸發H2AX絲氨酸139位點(Ser139)磷酸化,形成γH2AX焦點(foci),每個焦點對應一個DSB位點。γH2AX焦點數量與DSB嚴重程度正相關,可量化評估放療/化療的基因毒性。在三維肺上皮模型中,γH2AX持續存在提示修復失敗,導致染色體斷裂和癌變風險。
Epigentek提供的原位 DNA 損傷檢測試劑盒(貨號P-6001),可用于通過原位檢測 H2AXSer139 磷酸化來判斷 DNA 損傷或細胞凋亡。該試劑盒為即用型,能夠特異性地在培養的貼壁細胞中通過檢測磷酸化 H2AXSer139 來原位測定 DNA 損傷。檢測原理:在該實驗中,貼壁細胞首先被接種于常規 96 孔板中培養;接受實驗處理后,細胞經固定與透膜處理。隨后,利用抗磷酸化 H2AXSer139 抗體檢測 DNA 損傷的敏感標志物——H2AX 第 139 位絲氨酸的磷酸化水平。通過 HRP 標記的二抗顯色系統即可定量磷酸化 H2AXSer139 的比例或總量,顯色強度與 DNA 損傷程度成正比。
原位 DNA 損傷檢測試劑盒(貨號P-6001)核心優勢:
1. 原位保留空間信息:無需細胞裂解,直接檢測孔板內細胞,避免修復蛋白定位丟失。
2. 高通量 & 快速:3小時內完成檢測,適配96孔板自動化平臺。
3. 無需復雜設備:僅需酶標儀,無需流式細胞儀或顯微成像。
DNA 損傷檢測試劑盒(貨號P-6001)應用場景:
研究領域 | 典型應用 |
癌癥治療 | 評估放療/化療藥物(如紫杉醇、氮芥)的基因毒性 |
藥物開發 | 篩選DDR抑制劑(如HDAC抑制劑)的協同療效 |
毒理學 | 檢測納米材料(如金剛石納米顆粒)、樹脂單體的DNA損傷風險 |
代謝應激研究 | 量化能量應激(如葡萄糖剝奪)誘導的DSB |
文獻案例:黑色素瘤放療-化療協同機制研究
文獻標題:Synergetic effect of high dose rate radiations and paclitaxel selectively eliminates melanoma cells (Int. J. Mol. Sci., 2022)
研究設計:
模型:黑色素瘤細胞系暴露于高劑量率X射線(10 MV, 2400 MU/min) + 紫杉醇。
試劑盒:原位 DNA 損傷檢測試劑盒(貨號P-6001)
流程:
1.細胞輻照后1小時固定,原位檢測γH2AX。
2.比色法(450 nm)定量DSB水平。
結論:高劑量輻射聯合紫杉醇顯著提升γH2AX表達(較單一處理高3.2倍),證實協同誘導DSB。
Epigentek的EpiQuik In Situ DNA Damage Assay Kit(貨號P-6001)以γH2AX為分子燈塔,為DNA損傷研究提供快速、精準、可量化的解決方案。無論是探索癌癥治療新策略,還是評估環境毒性,它都是解鎖基因組穩定性研究的鑰匙!
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