Cell Biolabs：牛磺酸測定試劑盒（MET-5071）

前列腺癌（PCa）是男性最常見的惡性腫瘤之一，其治療常常面臨耐藥性問題。鐵死亡是一種新型的程序性細胞死亡方式，其特征在于脂質過氧化和鐵離子的積累，最終導致細胞膜破裂。腫瘤微環境中的因素，如代謝物和細胞外囊泡（EVs），能夠激活抗氧化機制并抑制鐵死亡，從而促進腫瘤細胞的存活和耐藥。TAMs在腫瘤微環境中扮演重要角色，能夠促進PCa的進展和治療抵抗。然而，TAMs如何抑制鐵死亡的具體機制尚不清楚。

2024年11月29日,上海交通大學醫學院高維強、董柏君、方煜翔共同通訊在期刊《ADVANCED SCIENCE》上在線發表題為“Taurine Inhibits Ferroptosis Mediated by the Crosstalk between Tumor Cells and Tumor-Associated Macrophages in Prostate Cancer”的研究論文，主要探討了牛磺酸通過前列腺癌（PCa）細胞和腫瘤相關巨噬細胞（TAMs）之間的相互作用抑制鐵死亡（ferroptosis）的機制。文章通過實驗驗證了?；撬嵩赑Ca中對鐵死亡的抑制作用，并揭示了其分子機制。

研究人員證明了腫瘤相關巨噬細胞通過激活LXRα/SCD1軸導出?；撬醽硪种魄傲邢侔┲械蔫F死亡。LXRα促進miR-181a-5p的表達并將其招募至腫瘤細胞釋放的外泌體中。外泌體介導的miR-181a-5p穿梭進巨噬細胞，通過抑制Hippo通路誘導巨噬細胞的M2極化，從而增強?；撬岬妮敵鲎鳛橐粋€正向反饋循環?；谘芯堪l現，通過使用相關抗體或小分子抑制劑阻斷?；撬岬霓D運可能成為潛在的輔助治療手段，以減弱這種巨噬細胞-腫瘤細胞交流，從而恢復前列腺癌對鐵死亡的敏感性。

方法

代謝組學分析

使用非靶向代謝組學分析M0-lCM和M2-lCM中的代謝物差異，以識別能夠抑制鐵死亡的候選代謝物。

基因敲除和過表達

通過CRISPR/Cas9系統敲除LXRα和TauT基因，使用miR-181a-5p mimics進行過表達實驗，以研究這些基因在鐵死亡中的作用。

細胞活力和鐵死亡檢測

使用CCK8試劑盒檢測細胞活力，通過測量脂質過氧化物（如MDA）和ROS水平來評估鐵死亡情況。

囊泡提取和鑒定

通過差速離心法從細胞培養上清中提取EVs，并使用透射電鏡（TEM）和納米顆粒追蹤分析（NTA）鑒定其形態和大小分布。

牛磺酸含量測定

使用Cell Biolabs的?；撬釡y定試劑盒（MET-5071）測定細胞和組織中的?；撬岷?。該試劑盒基于比色法原理，通過特定的酶促反應將?；撬徂D化為可量化的產物，從而準確測定樣品中的?；撬釢舛?。

實驗

?；撬嵋种畦F死亡

通過代謝組學分析，作者發現M2型巨噬細胞分泌的低分子量組分中含有顯著抑制鐵死亡的代謝物——?；撬?。進一步實驗表明，?；撬崽幚砟軌蝻@著提高PCa細胞的存活率，減少脂質過氧化物和MDA水平，從而抑制鐵死亡。

LXRα/SCD1信號通路的作用

作者發現?；撬崮軌蚣せ頛XRα受體，進而促進SCD1基因的表達。SCD1是抑制鐵死亡的關鍵基因，能夠通過產生單不飽和脂肪酸（MUFAs）來阻斷脂質ROS的積累。通過敲除LXRα或SCD1基因，作者驗證了這一信號通路在牛磺酸抑制鐵死亡中的作用。

miR-181a-5p的調控作用

LXRα不僅能夠激活SCD1，還能夠促進miR-181a-5p及其結合蛋白FUS的表達，從而增加腫瘤來源EVs中miR-181a-5p的富集。巨噬細胞作為這些EVs的受體細胞，攝入miR-181a-5p后促進其M2極化，并通過抑制lats1基因的表達來增強?；撬岬姆置?。

阻斷?；撬徂D運恢復鐵死亡敏感性

通過敲除TauT基因（牛磺酸轉運蛋白）來阻斷?；撬岬倪M口或出口，作者發現這能夠恢復PCa細胞對鐵死亡的敏感性。體內實驗也證實了TauT敲除聯合鐵死亡誘導劑RSL3能夠顯著抑制腫瘤生長。

結論

本文揭示了TAMs分泌的?；撬嵬ㄟ^激活LXRα/SCD1信號通路抑制PCa中鐵死亡的機制。同時，LXRα還調控miR-181a-5p的表達，促進其進入腫瘤來源的EVs中，進而被巨噬細胞攝取并促進其M2極化，增強?；撬岬姆置?。這一發現為開發針對PCa治療的新策略提供了理論依據，即通過阻斷?；撬岬霓D運來恢復腫瘤對鐵死亡的敏感性。

Cell Biolabs產品的作用和價值

在本文中，Cell Biolabs的?；撬釡y定試劑盒（MET-5071）發揮了關鍵作用。該試劑盒提供了一種高靈敏度、高特異性的方法來測定細胞和組織樣品中的牛磺酸含量，為研究牛磺酸在抑制鐵死亡中的作用提供了重要技術支持。通過準確測定牛磺酸的濃度變化，作者能夠驗證牛磺酸在PCa細胞與TAMs相互作用中的關鍵作用，并進一步揭示了其分子機制。因此，Cell Biolabs的牛磺酸測定試劑盒在本文的實驗設計中具有不可替代的價值，為研究代謝物在腫瘤生物學中的作用提供了有力的工具。