Biogradetech：Human T-Activator CD3/CD28 Beads

CAR-T和TCR-T是目前腫瘤免疫治療技術的熱點，不管是CAR-T技術還是TCR-T技術，T細胞的體外培養都可以使用CD3單抗和CD28單抗，刺激T細胞使其激活和擴增。  

Biogradetech的Human T-Activator CD3/CD28 Beads（貨號：C-BETA2001）是專為人類T細胞的分離和體外擴增而設計的，無需飼養層細胞即可活化T細胞。這些磁珠廣泛應用于各種T細胞培養技術，包括CAR-T細胞療法。借助與磁珠結合的抗人CD3和抗人CD28抗體，Human T-Activator CD3/CD28 Beads為分離和擴增人類T細胞提供了一種簡單而有效的方法。  

產品信息

• 貨號：C-BETA2001

• 反應性：人類

• 濃度：2 × 108 beads/mL

• 粒徑：5 μm

• 內毒素：1 EU/mL

• 用途：體外T細胞激活和擴增，適用于富集的T細胞或外周血單個核細胞（PBMCs）

• 配方：含有人血清白蛋白（HSA）的磷酸鹽緩沖鹽水（PBS），pH 7.4

• 穩定性：2年

所需材料

1. 人類T細胞培養基。

2. 用于最佳擴增的人類細胞因子，如IL-2、IL-7、IL-15等。

操作步驟

1. 洗滌Human T-Activator CD3/CD28 Beads

• 將珠子懸浮于管中，輕輕振蕩或傾斜旋轉以確保充分混合。

• 將所需體積的珠子轉移到新的管中。

• 加入等體積的含有1% HSA的PBS進行懸浮。

• 將管放置在磁架上1分鐘，廢棄上清液。

• 從磁架上取下管子，用相同體積的含有1% HSA的PBS重新懸浮珠子。

2. 分離CD3+ T細胞

• 輕輕懸浮Ficoll分離的PBMCs于含有1% HSA的PBS中，并調整細胞密度。

• 將洗滌過的珠子以適當的比例加入PBMCs中。

• 旋轉樣品并在室溫孵育。

• 使用T細胞培養基或含有1% HSA的PBS稀釋珠子和細胞的混合物，并將管子放置在磁架上。

• 去除上清液，并在含有IL-2的T細胞培養基中懸浮混合物。

3. T細胞激活和擴增

• 每天從第3天開始計數T細胞的數量。

• 在細胞擴增的后期，通過輕輕吹氣細胞懸浮液來解離珠子和細胞。

• 當CD3+ T細胞超過1 × 106 cells/mL時，使用含有IL-2的T細胞培養基稀釋細胞。

• 在培養結束時（第9-14天），計數細胞并使用磁架去除珠子。

產品數據展示

圖1 通過磁珠分離CD3+ T細胞。將PBMCs與Human T-Activator CD3/CD28 Beads（貨號：C-BETA2001）以3個珠子與每個細胞的比例孵育30分鐘，并通過流式細胞術分析陽性（分離）細胞的分離效率。  

圖2 純化的人類CD3+T細胞擴增。使用Human T-Activator CD3/CD28 Beads（貨號：C-BETA2001）刺激純化的人類CD3+ T細胞。細胞在含有300 IU/mL IL-2的T細胞培養基中擴增。激活后的細胞在高細胞存活率下擴增了13天。   

Biogradetech是全球生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的領先供應商。他們提供廣泛的產品組合，包括細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域的試劑。Biogradetech的產品受到全球生物研究機構和生物制藥公司的高度追捧，他們以高質量、可靠性和服務而聞名。