ALPCO：c-肽ELISA

ALPCO C肽ELISA用于定量測定人血清和血漿中的C肽。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品c-肽ELISA。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

c-肽ELISA 檢測方案：

ALPCO C肽ELISA是一種夾心型免疫測定法。96孔微孔板上涂有C肽特異性單克隆抗體。將標準品、對照品和樣品與測定緩沖液一起添加到微孔板孔中。然后將微孔板在微孔板振蕩器上以700-900rpm的速度在室溫下孵育。第一次孵育完成后，用洗滌緩沖液洗滌孔并吸干。然后加入共軛物，在微孔板振蕩器上以700-900rpm第二次孵育微孔板，洗滌并吸干。加入TMB底物，在室溫下在微孔板振蕩器上以700-900rpm第三次孵育微孔板。第三次孵育完成后，加入StopSolution，用分光光度計在450nm處測量光密度（OD）。產生的顏色強度與樣品中C肽的量成正比。

所需材料：

用于分配高達100微升的精密移液管（帶一次性吸頭）

用于分配高達100微升的可重復使用或多通道移液管

用于試劑配制的容量瓶和移液管

用于試劑配制的蒸餾水或去離子水

微孔板洗滌器或洗滌瓶

能夠以700-900轉每分鐘的速度工作的微孔板振蕩器

帶有450納米濾光片的微孔板閱讀器

用于樣本準備的渦旋混合器

注意事項：

試劑盒中包含的人血液制品已針對HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在進行了檢測。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的完全不存在；因此，所有試劑應被視為潛在的傳染性物質。處理和處置應符合所有適當的國家和地方關于潛在生物危害材料處理的規定。

所有來源于動物的材料均為瘋牛病陰性。然而，所有材料應遠離反芻動物。

避免與皮膚直接接觸。

本產品不可內服。

使用本產品時，避免進食、飲水或吸煙。

不要用口吸任何試劑。

試劑盒中的試劑是特定批次的，不得替換。

不要使用超過有效期的試劑。

不建議對測試程序進行變更，這可能會影響測試結果。

測定程序：

所有試劑和微孔板條在開封前應平衡至室溫（18-25°C）。使用前輕輕混合所有試劑。每次測定運行和每次使用多個微孔板時，都必須執行標準曲線。所有標準品、對照品和樣本都應雙重運行。

1. 在打開鋁箔袋前，應先將微孔板平衡至室溫。為標準品、對照品和樣本的雙重測定分配足夠的微孔板條。其余的微孔板條應存放在含干燥劑的密封鋁箔袋中，置于2-8°C。

2. 將每個標準品、對照品和樣本的25微升分別吸入相應的孔中。見試劑準備。

3. 向每個孔中加入50微升的測定緩沖液。

4. 用板封膜覆蓋微孔板，在室溫下孵育1小時，在微孔板振蕩器上以700-900轉每分鐘的速度搖動。

5. 倒掉孔中的內容物，使用微孔板洗滌器用每次350微升的工作強度洗滌緩沖液洗板6次（見試劑準備）?；蛘?，使用帶有洗滌噴嘴的洗滌瓶將工作強度洗滌緩沖液注入孔中。（不建議使用多通道移液管。必須以足夠且均衡的力量分配洗滌緩沖液，以便正確洗滌孔。）每次洗滌之間，將微孔板倒置以丟棄液體，并在吸水紙上用力拍打倒置的微孔板。在最后洗滌后（自動或手動），通過倒置并用力拍打微孔板在吸水紙上，去除孔中的任何殘留洗滌緩沖液和氣泡。

6. 向每個孔中加入100微升的工作強度結合物（見試劑準備）。

7. 用板封膜覆蓋微孔板，在室溫下孵育1小時，在微孔板振蕩器上以700-900轉每分鐘的速度搖動。

8. 倒掉孔中的內容物，并用350微升的工作強度洗滌緩沖液洗板6次（見步驟5）。

9. 向每個孔中加入100微升的TMB底物。

10. 用板封膜覆蓋微孔板，在室溫下孵育15分鐘，在微孔板振蕩器上以700-900轉每分鐘的速度搖動。

11. 向每個孔中加入100微升的終止溶液，并輕輕搖動微孔板以混合內容物。在進行下一步之前，去除任何氣泡。

12. 將微孔板放入能夠讀取450納米吸光度的微孔板閱讀器中。在加入終止溶液后應立即分析微孔板，且不得超過30分鐘。

文獻參考：

1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

作為ALPCO在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。