Anaspec：Aβ肽

阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是一種進行性神經退行性疾病，主要病理特征包括腦內神經炎性斑塊的形成，這些斑塊主要由淀粉樣β（amyloid-β，Aβ）肽組成。Aβ肽是由淀粉樣前體蛋白（Amyloid Precursor Protein, APP）經過一系列蛋白酶解過程產生的。APP不僅在神經元中表達，還存在于外周血細胞和免疫細胞中，特別是在單核吞噬細胞（如單核細胞和巨噬細胞）以及小膠質細胞中。然而，APP在這些免疫細胞中的具體功能尚不完全清楚。

以往的研究表明，單核吞噬細胞在激活和吞噬過程中會釋放Aβ肽，提示Aβ肽可能在炎癥過程中發揮生理作用。而“N-truncation and pyroglutaminylation enhances the opsonizing capacity of Aβ-peptides and facilitates phagocytosis by macrophages and microglia”旨在探討不同形式的Aβ肽對吞噬作用的影響，以及它們是否可以作為調理素（opsonin）促進病原體的清除。特別地，該研究還關注了N端截短和焦谷氨酸化修飾的Aβ肽在吞噬過程中的作用。

研究方法

1. 細胞分離與培養：

人外周血單核細胞（PBMCs）：通過Ficoll密度梯度離心法從健康供體的血液樣本中分離得到。

單核細胞：使用MACS單核細胞分離試劑盒從PBMCs中進一步分離。

巨噬細胞：通過培養單核細胞7天，并添加粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF）或巨噬細胞集落刺激因子（M-CSF）進行M1或M2極化。

THP-1細胞：一種人單核細胞系，用于分化為巨噬細胞。

2. Aβ肽包被

使用Anaspec品牌的Aβ(1-40)、Aβ(1-42)、Aβ(2-40)、Aβ(2-42)、Aβ(3p-42)和Aβ(5-42)多肽，通過特定的方法將多肽包被到聚苯乙烯顆粒（PSPs）和大腸桿菌（E. coli）表面。包被后的顆粒和細菌用于后續的吞噬實驗。

3. 吞噬作用的量化

通過流式細胞術檢測吞噬細胞的平均熒光強度（MFI），以此作為吞噬顆粒數量的指標。實驗包括使用不同Aβ肽預處理吞噬細胞，以及使用包被有Aβ肽的顆粒和細菌進行吞噬實驗。

4. 細胞表面抗原和細胞因子檢測

通過流式細胞術檢測巨噬細胞表面抗原（如MSRI、IL-1RI、HLA-DR等）的表達。進一步通過ELISA方法檢測細胞培養上清中IL-10和TNF-α的水平。

實驗結果

1. Aβ肽促進吞噬作用

溶性Aβ肽：在細胞培養介質中添加可溶性Aβ(2–40)和Aβ(2–42)以及Aβ(1–42)可誘導人單核細胞對聚苯乙烯顆粒（PSPs）的吞噬作用。相比之下，Aβ(1–40)沒有顯著效果。

包被Aβ肽：用所有測試的Aβ肽預孵育PSPs均可顯著增加單核細胞對顆粒的吞噬。其中，N端截短的Aβ(x–42)比Aβ(x–40)更有效地促進吞噬。

如圖，Aβ肽通過調理作用促進吞噬作用。將Aβ肽變體以1 ?g/mL的濃度添加到新鮮分離的單核細胞（A）或分化的THP-1巨噬細胞（C）的細胞培養基中。或者，將PSPs（可能是某種顆?；虿≡w）預先與Aβ肽變體孵育后，再加入到單核細胞（B）或THP-1巨噬細胞（D）的培養中。通過流式細胞術分析，以吞噬細胞的平均熒光強度（MFI）作為吞噬熒光標記PSPs數量的指標進行定量（黑色條）。通過向培養基中加入5uM的細胞松弛素D來評估顆粒對吞噬細胞的非特異性結合（灰色條）。MFI值以未處理對照細胞的百分比（% of Con）表示。數據代表五個獨立實驗的平均值±標準差（SD）。

2. Aβ肽的調理素作用

Aβ肽作為調理素，通過增加顆粒和細菌的疏水性，促進其與吞噬細胞的結合，從而增強吞噬作用。特別是N端截短和焦谷氨酸化的Aβ(x–42)效果最為顯著。

3. 吞噬過程中的炎癥極化

吞噬Aβ肽包被顆粒后，單核細胞表現出促炎表型，包括MSRI表達降低和IL-10分泌減少。這表明Aβ肽可能通過誘導促炎極化，影響吞噬細胞的功能狀態。

本研究揭示了Aβ肽在吞噬作用中的復雜角色，特別是N端截短和焦谷氨酸化修飾對其功能的影響。Anaspec品牌的Aβ肽作為高質量的研究試劑，不僅為本研究提供了可靠的工具，也為未來探索Aβ-肽在免疫系統中的功能以及開發相關治療藥物奠定了堅實的基礎。未來的研究將進一步揭示Aβ肽在AD病理過程中的具體機制，為開發更有效的治療策略提供新的思路。

Anaspec作為多肽生產專家，可以提供各種Aβ肽，助力AD病理研究：