TECHNICAL COLUMN
技術專欄
在Western Bloting實驗中,可能存在總蛋白濃度測定不準確,或者蛋白質樣品在電泳前上樣時產生的樣品間的操作誤差;這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參,比如內參GAPDH的含量來進行校正。當然除了GAPDH抗體,β-Actin抗體、β-Tubulin抗體等也是最常見的內參抗體。GAPDH(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)是參與糖酵解的一種關鍵酶,由4個30-40kDa的亞基組成,分子量146kDa,檢測條帶大約在36kDa。GAPDH基因幾乎在所有組織中都高水平表達,廣泛用作Western blot蛋白質標準化的內參。
選擇合適的GAPDH抗體顯得尤為重要,首先GAPDH的WB檢測條帶大約為36kDa,因此對于一些待檢測分子量大于40kDa或者小于30kDa的目的蛋白尤為合適。一般來說,國產的抗體在質量穩定性、效價等方面存在不足,但是進口品牌如Abcam、Millipore、CST等價格偏高,一般在¥3000/100ul左右。下面我們為您推薦三款GAPDH原裝進口抗體。美國Abbkine的Anti-GAPDH Monoclonal Antibody(貨號A01020)是小鼠源的單抗,其效價很高,廠商推薦的WB起始稀釋比率為1:1000,實際應用過程中,有使用1:10000或更高的報告,遠遠高于此稀釋比率,說明其免疫效價很高,另外,其檢測種屬也很多,包括人、牛、豬、小鼠、大鼠等。右圖為Abbkine的Anti-GAPDH Monoclonal Antibody(貨號A01020)在不同細胞系內WB的檢測結果。
| 貨號 | 品牌 | 品名 | 來源 | 應用類型 | 特點 | 說明書 |
| A01020 | Abbkine | Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5) | 小鼠 | WB, IHC | 效價極高,檢測種屬多 | 點擊 |
| A01025 | Abbkine | HRP, Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (2B5) | 小鼠 | WB | 排除二抗干擾 | 點擊 |
Abbkine的HRP, Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (2B5) (貨號A01025)則是一款HRP直標的小鼠源單克隆GAPDH抗體,由于是HRP直接標記,因此不會受到二抗的干擾,在一些IP應用中非常合適,可有效排除IP-WB時的重鏈干擾。左圖為Abbkine的GAPDH Monoclonal Antibody(貨號A01020)抗體在石蠟包埋、福爾馬林固定的切片上的應用。
更多GAPDH內參抗體以及其他如Actin、Tubulin等其他內參抗體,請電話垂詢。美國Abbkine品牌是一 家提供高性價比免疫學和細胞學科研產品及解決方案的品牌,艾美捷將其引入中國,作為其中國區域代理,將為客戶提供最具性價比的常規免疫學試劑,如各種標簽抗體、內參抗體、常規一抗以及全系列二抗,抗體檢測底物以及相關試劑盒等。同時我們作為多家國際知名品牌的的中國代理或區域代理,能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產品感興趣,請致電全國免費電話400-6800-868 轉801/802/803 或者027-84454412/4876 到艾美捷科技有限公司垂詢相關的產品信息及完整實驗解決方案。
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