抗體保存指南

不同類型抗體儲存時注意要避免污染或損失

(請每次均查看抗體說明書是否有特殊的保存要求。Abcam 公司對于非正確保存的抗體不保證其有效。

對于保存適當的抗體，大多數的活性保持時間為數個月甚至數年。)

保存溫度和條件

很多抗體的最佳保存條件是分裝成小包裝凍存于 -20°C 或 -80°C。分裝能使凍融引起的損失減到最小，同時可避免多次在一個管內取樣而由 槍頭引入的污染。分裝凍存的抗體，融解一次后剩余抗體應保存于 4°C。收到抗體后，應 10,000 x g 離心 20 秒，使管口螺紋內的抗體溶液 全部離心至管底，用低蛋白吸附性的微量離心管分裝。分裝量的多少取決于每次試驗的使用量。分裝量不能少于 10μl；分裝量越少，由于蒸 發和吸附于管內壁而引起的損失會越大。

除了腹水液含蛋白酶應立即凍存外，大多數抗體接收后可在 4°C 保存一至兩周，隨后可凍存以長期保存。同樣，應按照說明書推薦的條件進 行保存。
免責聲明和其他特殊情況酶聯抗體，不應凍存，4°C 可保證穩定。凍融會降低酶的活性，同時影響抗體的吸附能力。

偶聯標記的抗體，無論是標記的熒光染料、酶還是生物素，都應保存于深色的管內并包裹上鋁箔。如果暴露在光線下可能會減弱偶聯標記物 的活性。熒光標記物尤其容易受到光漂白作用，整個實驗過程中均應避光。

免疫球蛋白 G3 同種型抗體凍融后易形成聚合物，因此應一直保存于 4°C。

用疊氮化鈉防止污染

為防止微生物污染，在抗體溶液中應加入疊氮化鈉，終濃度為 0.02%（質量百分比）。很多品牌 的抗體已經包含了 0.02-0.05%的疊氮化 納，在說明書的“保存緩沖液”部分會有描述。

什么時候不能用疊氮化納

如果用抗體標記活細胞，或用于體內實驗，確保所用制劑中不含疊氮化鈉。這種抗生素對大多數有機體都有毒性：會阻斷細胞色

素電子傳遞系統的信號。

疊氮化鈉會干擾胺基的偶聯標記，應在進行標記之前將其除去。標記后抗體可保存于疊氮化納，也可用不含胺基的硫柳汞替代。

疊氮化鈉可用透析或凝膠過濾法從抗體溶液中除去。免疫球蛋白 G 的分子量是 150,000 kDa（免疫球蛋白 M 的分子量是 600,000
kDa），疊氮 化鈉的分子量是 65 道爾頓。使用 14,000 kDa 的微量透析裝置，隨著疊氮化鈉的擴散，抗體將保留。將帶有燒杯的磁力攪拌器置于4°C攪拌 透析裝置 6 小時,每毫升抗體溶液要用至少1升的磷酸鹽緩沖液。更換 2 次磷酸鹽緩沖液，每次均攪拌至少 6 小時。如果可以的話，所有材料 均要求無菌，所有溶液都應無菌配制。

凍存/復蘇的損失

反復凍融可使抗體變性，使其形成聚合物而降低了抗體結合能力。

大多數抗體在 -20°C 保存就足夠了，沒有必要置于 -80°C 保存。千萬不要使用無霜的冰箱。反復凍融能減少霜的形成，但這正是應該避免的。 同理，抗體應該放置于冰箱中溫度變化最小的部位，如應放置于冰箱格里，而不應放置于冰箱門上。

一些研究者為防止反復凍融的損失，在抗體中加入終濃度為 50% 的甘油作為抗凍劑。甘油可以將冰點降低至 -20°C 以下。很多抗體都可以 這樣做，本公司提供的抗體只有一小部分測試了這種保存條件下的穩定性，我們只保證那些按照說明書推薦條件儲存的抗體有活性。由于 -80°C 低于甘油的冰點，所以加了甘油的溶液不應保存于 -80°C。注意，甘油可能會被細菌污染。如果要加入甘油或其他防凍劑，應注意無菌處理。

稀釋至工作濃度的抗體最好不要在 4°C 保存超過一天時間。通常蛋白質在較高濃度保存時不易發生降解，理想濃度為 1mg/ml或更高，因為 抗體溶液中包含了如牛血清白蛋白等蛋白質穩定劑。加入的蛋白可吸附于管壁從而使抗體的損失減到最小。對用于聚合的抗體，不應加入蛋 白穩定劑，因為其可能會與抗體競爭而降低抗體的聚合活性。