完全弗氏佐劑（CFA）使用建議及應用說明

弗氏佐劑旨在提供釋放刺激強細胞所必需的抗原持續的免疫反應。CFA的使用應負責任且謹慎以避免或盡量減少過度炎癥。對于大多數應用程序，CFA通常僅用于初始免疫，而IFA是選擇后續免疫接種。

完全弗氏佐劑（CFA）是一種油包水每毫升含1毫克熱殺干乳劑結核分枝桿菌。CFA和IFA使用最多的佐劑廣泛應用于實驗免疫學。完成弗氏佐劑在實用的獸醫疫苗接種。CFAVax由礦物油和乳化劑的混合物組成以85%v/v油和15%v/v乳化劑的比例。每10個mL CFA小瓶含有10 mg分枝桿菌。

重要的是，CFAVax不是預先形成的乳液因此它必須與相等體積的抗原水溶液，隨后乳化在使用之前。乳化劑是單油酸曼尼酯由甘露醇作為親水殘基組成的酯和油酸（不飽和C18脂肪酸）作為疏水部分。即使油的作用機制乳液仍然鮮為人知，一些證據建議對NOD2進行部分要求。此外，這些乳液在注射，從而在壞死細胞死亡也可能是它們的佐劑活動免疫反應顯著增強分枝桿菌成分的存在吸引巨噬細胞和免疫細胞注射CFA主要誘導Th1應答可引起肉芽腫和嚴重炎癥接種部位的反應。

艾美捷完全弗氏佐劑（CFA）#OZB-CFA0100啟動前的建議：

接種物應無外來微生物污染在與推薦使用佐劑。含有完全弗氏佐劑的注射劑應皮下注射：建議將將含有佐劑的接種物分成若干部分在小鼠或大鼠中每個部位注射超過0.1毫升，0.25毫升每個兔子的位置。如果在進行這些操作時導致皮膚壞死指導方針，未來的注射應該間隔更遠。

1.使小瓶渦旋以重新懸浮分枝桿菌。

2.在3毫升魯爾膠中制備1毫升CFAVax佐劑注射器

3.在鹽水緩沖液或磷酸鹽緩沖液中稀釋抗原混合物最終免疫原濃度為10-100?g/100?L（足以免疫小鼠、大鼠和兔子）。

4.在3毫升魯爾鎖式塑料注射器中制備1毫升抗原

5.形成乳液：

a.使用雙端鎖定連接兩個注射器連接器

b.來回按壓注射器筒，轉移內容物從一個注射器到另一個。白色乳液應該立即形成

c.混合5至10分鐘：產生穩定的乳液

d.所得乳液應呈現白色，穩定落入水中時不應散開

注：對于較小的體積，可以通過以下方式進行長時間混合有力地吸吮或渦旋。對于較大的體積，請使用紙巾均化器以形成乳液。

6.在連接之前，分離注射器并排出空氣針（小鼠或大鼠21g；兔子19g）

7.根據下表向動物體內注射；這個體積取決于注射部位。

8.有必要將多個注射部位隔開一段距離足以避免炎性病變合并。

注：弗氏佐劑的優先給藥途徑應為皮下，因為它破壞性較小?？梢允褂闷渌肪€：肌內、皮內或腹膜內。

完全弗氏佐劑（CFA）應用：

與引發Th2反應的IFA相反，CFA主要誘導Th1反應。分枝桿菌成分在注射部位吸引巨噬細胞和免疫細胞參與強烈的炎癥反應。弗氏佐劑旨在提供刺激強持續免疫反應所必需的抗原的持續釋放。對于大多數應用，CFA通常用于初始免疫，而IFA是后續免疫的首選佐劑。

推薦用于：刺激Th1反應，初始免疫，抗體產生。

SC =SC = Subcutaneous, IM = Intramuscular, ID = intradermal, IP = intraperitoneal,

IV = IV = intravenous, N.R. = not recommended, N.A. = not acceptable

弗氏推薦量每個注射途徑的佐劑/抗原乳液不同的動物種類（改編自Hendriken CFM et Hau J.，2003，載于《實驗動物科學手冊》卷I） 。

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