Reddot Biotech大鼠促甲狀腺激素 (TSH) ELISA試劑盒化驗程序

大鼠促甲狀腺激素 (TSH) ELISA試劑盒是一種夾心酶免疫分析法，用于大鼠血清、血漿和其他生物液體中TSH的體外定量測量。  

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大鼠促甲狀腺激素 (TSH) ELISA試劑盒：

樣本采集和存儲：

• 血清-使用血清分離管，使樣品在室溫下凝結2小時或在4°C下過夜，然后在約1000×g離心20分鐘。立即測定新鮮制備的血清，或將樣品儲存在-20°C或-80°C的等分試樣中，以備日后使用。避免重復冷凍/解凍循環。

• 血漿-使用EDTA或肝素作為抗凝劑收集血漿。在收集后30分鐘內，在2-8°C下以1000×g離心樣品15分鐘。立即取出血漿并進行化驗，或將樣品儲存在-20°C或-80°C的等分試樣中，以備日后使用。避免重復冷凍/解凍循環。

• 其他生物流體.在1000×g條件下離心樣品20分鐘。去除顆粒并立即測定或在-20°C或-80°C條件下將樣品儲存在等分試樣中。避免重復冷凍/解凍循環。

  注：

• 5天內使用的樣品可在4°C下儲存，否則樣品必須在-20°C（≤1個月）或-80°C（≥2個月）下儲存，以避免生物活性損失和/或污染。

• 明顯的溶血會影響抗體抗原反應。有溶血跡象的樣品不可用于本試驗。進行分析時，將樣品置于室溫

大鼠促甲狀腺激素 (TSH) ELISA試劑盒化驗程序：

• 確定稀釋標準、空白和樣品的孔。準備7個標準孔，1個空白孔。將100μL標準溶液（參見試劑制備）、空白溶液和樣品分別加入適當的孔中。用板密封劑覆蓋。在37°C下孵育90分鐘。

• 從每個井中取出液體，不要清洗。

• 向每個孔中加入100μL檢測溶液A。用平板密封劑覆蓋后，在37°C下孵育45分鐘。

• 吸入溶液，并使用噴射瓶、多通道移液管、歧管分配器或自動清洗機，用300μL 1×清洗溶液清洗每個孔，并靜置1-2分鐘。通過在吸水紙上輕敲板，將所有孔中的剩余液體完全清除。徹底清洗3次。最后一次洗滌后，通過抽吸或潷析去除剩余的洗滌緩沖液。翻轉盤子，用吸水紙吸住。

• 向每個孔中加入100μL檢測溶液B。用平板密封劑覆蓋后，在37°C下孵育45分鐘。

• 如步驟4所述，重復抽吸/洗滌過程共5次。

• 向每個孔中加入90μL基質溶液。用新的板材密封劑覆蓋。在37°C下培養15-25分鐘（不要超過30分鐘）。避光。加入基質溶液后，液體將變為藍色。

• 向每個孔中加入50μL停止溶液。加入停止溶液后，液體將變黃。輕敲盤子的側面，混合液體。如果顏色變化不均勻，輕輕拍打盤子以確保充分混合。

• 去除盤子底部的水滴和指紋，并確認液體表面沒有氣泡。運行微板讀取器，立即在450 nm處進行測量。

注：

• 化驗準備：為每個實驗保留適當數量的孔，并從微量板上移除多余的孔。剩余的井應重新密封并儲存在-20°C。

• 樣品或試劑添加：請使用新制備的標準品。小心地向孔中加入樣品，并輕輕混合以避免起泡。不要觸摸井壁。對于程序中的每個步驟，將試劑或樣品添加到測定板的總分配時間不應超過10分鐘。這將確保每個移液步驟的經過時間相等，不會中斷。雖然不需要，但建議復制所有標準和試樣。為避免交叉污染，在添加標準品、樣品和試劑之間更換移液管尖端。此外，對每種試劑使用單獨的容器。

• 孵育：為了確保準確的結果，孵育步驟中需要適當粘附板密封劑。在培養步驟之間，不要讓井長時間處于未覆蓋狀態。一旦試劑添加到孔條中，在測定過程中任何時候都不要讓孔條干燥。必須控制培養時間和溫度。

• 清洗：清洗程序至關重要。在每個步驟中完全去除液體對于良好的性能至關重要。最后一次洗滌后，通過抽吸或潷析去除剩余的洗滌液，并去除盤子底部的水滴或指紋。洗滌不足將導致精度差和錯誤的吸光度讀數升高。

• 反應時間的控制：添加TMB底物后觀察顏色的變化（例如，每10分鐘觀察一次），如果顏色太深，請提前添加停止溶液，以避免反應過強，從而導致吸光度讀數不準確。

• TMB基板對光敏感，容易被氧化劑污染。請保護其免受光照和潛在污染源的影響。

• 環境濕度可能影響從試劑盒獲得的結果。如果設施內的濕度低于60%，建議使用加濕器

Reddot Biotech是由一支擁有35年醫療管理經驗團隊創辦的加拿大本土品牌，其已在ELISA產品線上深耕7個年頭，并且仍在不斷前進中。產品的質量保證也讓其越來越多被“收納進”文獻當中，產品線包括ELISA試劑盒、抗體、少量生化試劑，其中ELISA試劑盒超過6000+，物種類型較多：人；大鼠；小鼠；犬科類；牛科；魚；雞；豬；兔；山羊；綿羊；猿；馬；豚鼠等，像激素類指標促卵泡素（FSH）、促黃體激素（LH），新冠相關病毒受體ACE2、ACE以及腫瘤免疫相關的指標精氨酸酶（ARG）等已是熱門應用指標。