科研小技巧：如何使用Norgen碳化硅技術減少SARS-CoV-2的假陰性結果

       您的COVID-19工作流程是否可能不如您設想的那樣準確？在COVID-19疫情開始時，研究人員和實驗室爭先恐后地開發了SARS-CoV-2測試試劑盒。通過大量的反復試驗，確定了標準測試方法，并在世界范圍內被廣泛接受。但是，如果有一種比現行標準方法更準確的檢測方法呢？

      世界需要大規模檢測的解決方案，以有效排除假陰性，確保每個人的安全。如果繼續往下看，您會了解到可能有更準確的COVID-19檢測方法可用。

      COVID-19假陰性：

      假陰性是研究人員和臨床醫生在使用當前標準的SARS-CoV-2病毒RNA提取方法時面臨的最大挑戰之一。

      通過鼻咽拭子或其它樣本采集方法采集到樣本后，將其存儲在病毒運輸介質（VTM）或通用運輸介質（UTM）中。這就是挑戰的開始。培養基常常不能有效地保存病毒RNA，因為它只能在室溫下穩定臨床樣本中的病毒RNA長達3天。這導致病毒RNA的快速降解/碎片化。此外，對于安全處理，VTM/UTM不能使樣品無傳染性。

      病毒RNA碎片化為何那么重要？目前的RNA提取標準（基于二氧化硅磁珠的技術）不能有效地捕獲高度片段化的RNA。這是由于基于二氧化硅的技術傾向于結合更大的RNA序列。如果未完全捕獲片段化的病毒RNA，則在基于qRT-PCR的檢測中產生假陰性COVID-19結果的可能性將大大提高。

      COVID-19 RNA提取方法的比較研究：

      這與COVID-19標準化工作流程中的病毒RNA提取方法不一致，因此Norgen團隊進行了一項研究，將Norgen的提取方法與基于二氧化硅磁珠的技術進行了比較。目的是確定在捕獲SARS-CoV-2片段化病毒RNA的敏感性方面，不同的RNA提取方法是否存在差異。從Boca Biolistics（FL, USA）采購了44份臨床鼻咽拭子樣本。使用FDA / EUA批準的PerkinElmer?SARS-CoV-2實時RT-PCR檢測方法，對樣本進行預篩選，確認44份樣本為SARS-CoV-2陽性。

      二氧化硅OR碳化硅？

      研究了兩種RNA提取方法在檢測上述44種臨床樣品中檢測SARS-CoV-2病毒RNA的準確性方面的效率。

第一種方法是提取病毒RNA最常用的方法，傳統的基于二氧化硅磁珠的技術（Zymo Research的Quick-DNA / RNA Viral MagBead）提取病毒RNA。第二種方法是基于碳化硅的提取方法（Norgen唾液/拭子RNA純化試劑盒）。

      什么是最佳的RNA純化技術？

到這里事情逐漸變得有趣起來。使用這兩種方法提取RNA，并使用Norgen的2019-nCoV TaqMan RT-PCR Kit（Cat. TM67100）進行qRT-PCR檢測，針對CDC推薦的3個基因（N1、N2和RP）。

當比較兩種方法的qRT-PCR數據時，我們發現基于二氧化硅磁珠的提取方法對SARS-CoV-2真陽性樣本的假陰性率為25％。在另一方面中，和基于二氧化硅磁珠的方法相比，基于碳化硅的提取方法產生了對SARS-CoV-2樣本的100％的真陽性率和更一致的Ct值。這些結果清楚地表明假陰性結果可以通過使用基于Norgen碳化硅（SiC）的技術而不是傳統的基于二氧化硅的技術來進行避免。

      如何改進您的COVID-19檢測中RNA提取流程？

      碳化硅是一種新型的RNA提取技術，具有出色的RNA結合親和力——特別是對小的、高度降解的RNA片段，如病毒RNA。碳化硅對所有RNA序列具有一致的結合親和力，對GC的含量或大小沒有偏見。此外，碳化硅不需要任何載體RNA或諸如苯酚/氯仿之類的有害化學物質。

      為什么以前沒有聽說過基于碳化硅的RNA提??？

      碳化硅是Norgen Biotek的RNA提取專利技術。Norgen公司成立于1998年，總部位于加拿大安大略省，一直利用基于碳化硅技術為客戶從具有挑戰性的樣本中大幅度提高RNA的產量和質量。目前，Norgen的碳化硅（SiC）技術已用于FDA批準的COVID-19工作流程中，以進行24小時公共測試。

      這對您來說意味著什么？

      檢測實驗室必須使用最準確的技術，以確?？煽繄蟾鍿ARS-CoV-2病毒感染情況?；跇藴识趸璐胖榈奶崛》椒赡懿皇菣z測SARS-CoV-2最準確的方法，正如在研究中看到的，假陰性率為25%。

現在是對整個篩查工作流程的質量進行評估的時候了——從采集生物樣本，到病毒RNA提取，再到SARS-CoV-2檢測——以最終保護全球人口的健康和安全。

      在聽完小編的介紹后，您是不是很想知道Norgen Biotek為廣大的科研工作者提供了哪些RNA提取相關產品呢？艾美捷科技作為專業的生命科學領域解決方案供應商，為您推薦中國區獨家總代理Norgen Biotek品牌的部分RNA提取相關產品。

原圖索取請找艾美捷科技

      以上圖片僅列出部分，更多樣本提取相關產品，歡迎垂詢艾美捷科技~

      Norgen Biotek一直在不斷的改善自己的產品。在不斷完善產品的過程中，也會充分采納使用者的意見。目前Norgen Biotek正在進行一項“糞便收集和保存等相關產品”的市場調查，對于在以下調查表中提出的問題，非常歡迎中國的客戶提出寶貴的意見。

      歡迎點擊并填寫此調查表，鏈接：https://us8.list-manage.com/survey?u=7559e0f5557dd3b9a17cb2acb&id=d1379793bc&attribution=false

     作為一家具有高端的技術實力、先進的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業，總部位于武漢光谷高新技術開發區，服務面向全國。艾美捷科技是集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技公司，為用戶提供專業的前沿資訊、完備的產品、整合的解決方案，及優質的物流服務。為了更好的服務客戶，公司組建了一支經驗豐富的研發團隊-艾美捷生物技術中心，進入研發生產階段，將更優質的產品推薦給國內生物領域的同仁們!

      艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商優保持著密切的合作關系，目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理，主要包括：AmyJet、AAT Bioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Biosensis、Biovision、Caisson Labs、Cayman Chemical、Cell Biolabs、Cytoskeleton、Demeditec、Duchefa、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、Fitzgerald、GeneCopoeia、Hycult Biotech、ImmunoReagents、ImmunoStep、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、Mabtech、Matreya、Norgen Biotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、Solis BioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、US Biological、TRC等，可以在短時間內為用戶提供專業的前沿資訊、完備的產品及物流服務。