Biotium熱銷產品鬼筆環肽，CF 647（BTM-00041）說明書

Phalloidin是一種從致命的鵝膏菌中分離出來的毒素。它是一種與F-肌動蛋白特異性結合的雙環肽（1）。這是一個非常方便的研究用熒光染料標記時F-肌動蛋白分布的工具。Phalloidin在半胱氨酸和色氨酸之間含有一個不尋常的硫醚橋形成內環結構的殘留物。在升高的pH下，這種硫醚被裂解并且毒素失去了對肌動蛋白的親和力。CF?染料是Biotium開發的一系列下一代熒光染料在亮度、光穩定性和水溶性方面具有綜合優勢與其他熒光染料相比。熒光標記鬼筆色素染色F-肌動蛋白在納摩爾濃度下（1,3）。標記的鬼筆苷對兩者具有相似的親和力大小細絲，以約一個鬼筆肽的化學計量比結合來自不同物種的肌肉和非肌肉細胞中每個肌動蛋白亞單位的分子植物和動物。   

與抗體不同，鬼筆肽的結合親和力在不同物種之間，肌動蛋白沒有顯著變化。非特定染色可以忽略不計，染色和未染色區域之間的對比度非常大。Phalloidin使單體/聚合物的平衡向聚合物，將聚合的臨界濃度降低30倍(3,4). Phallotoxins還通過抑制引起的解聚來穩定F-肌動蛋白通過細胞松弛素、碘化鉀和升高的溫度。因為鬼筆肽偶聯物較小，直徑約為12-15?分子量＜2000道爾頓，多種肌動蛋白結合蛋白，包括肌球蛋白、原肌球蛋白和肌鈣蛋白在用鬼筆色素。更重要的是，鬼筆肽標記的肌動蛋白絲仍然存在功能的標記的甘油化肌纖維仍然收縮，標記的肌動蛋白絲仍然在固相肌球蛋白底物上移動（5，6）。熒光鬼筆素也可用于量化細胞中F-肌動蛋白的量（7，8）。   

作為Biotium全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Biotium熱銷產品鬼筆環肽，CF 647。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

儲備溶液的制備：

CF?染料鬼筆肽偶聯物：將凍干固體溶解在甲醇或水中（對于300U尺寸為1.5mL或對于50U尺寸為0.25mL）以產生200 U/mL。   

其他熒光鬼筆肽綴合物：將300 U凍干固體溶于1.5 mL以產生200U/mL（約6.6uM）的儲備溶液。生物素XX鬼筆肽：將100U凍干固體溶解在1mL甲醇中，得到100U/mL（約10uM）的儲備溶液。熒光鬼筆肽的一個單位（U）定義為所用材料的量對一張固定細胞的顯微鏡載玻片進行染色。對于熒光鬼筆素，一個單位是相當于在200μL的總染色體積中的5μL的200 U/mL儲備溶液。對于生物素XX鬼筆肽，一個單位相當于10 uL的100 U/mL儲備溶液總染色體積為200微升。

圖：CF?488A與FITC相比的相對光穩定性。HeLa細胞用CF?488A或FITC鬼筆肽偶聯物染色并連續暴露在使用汞弧燈顯微鏡的100X物鏡下。圖片為在t=0和t=5秒的光漂白下捕獲   

文獻參考：

• 1) Springer-Verlag New York. 47(1986);

• 2) J Muscle Res Cell Motil. 9, 370(1988);

• 3) Methods Enzymol. 85, 514(1982);

• 4) Eur J Biochem. 165, 125(1987);

• 5)Nature. 326, 805(1987);

• 6)Proc Natl Acad Sci USA. 83, 6272(1986);

• 7) Blood. 69,945(1987);

• 8) Anal Biochem. 200, 199(1992);

• 9) J Cell Biol 105. 1473(1987);

• 10)Proc Natl Acad Sci USA. 77, 980(1980);

• 11) Nature. 284, 405(1980);

• 12) CRC Crit Rev Biochem. 5, 185(1978);

• 13) J Cell Biol. 106, 1229(1988);

• 14) J Cell Biol. 103,265a(1986);

• 15) Eur J Cell Biol. 24, 176(1981);

• 16) Proc Natl Acad Sci USA. 74,5613(1977).

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Biotium公司是一家在熒光技術領域獨樹一幟的生物技術公司，公司位于美國加利福尼亞的BAY AREA------中外知名首要的生物科技中心。該公司一直致力于開發和生產用于生物醫學研究的熒光指示劑及其他特殊生化產品。其產品被廣泛應用于細胞生 物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液流動檢測及大規模藥物篩選等眾多領域。Biotium公司專利產品眾多，包括已經被廣泛使用的實時PCR定量熒光染料EvaGreen、具有劃時代意義的凝膠核酸染料Gel Red和GelGreen，以及最新推出的Cheetah Taq熱啟動酶和CF系列蛋白質標記染料等。 目前，Biotium已將其許多專利技術授權給一些主要的國際生物技術公司，包括安捷倫、BD生物科學、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。