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細菌被廣泛用于表達不同的蛋白質。然而,通過重組技術在細菌中表達的70-80%的蛋白通常包含在不溶性包涵體中(即蛋白質聚集體)中。由于折疊錯誤,在這些亞細胞結構中發現的蛋白質通常是無活性的。包涵體中重組蛋白的產率始終高于可溶性蛋白。這背后的原因被認為是不溶性蛋白質對細胞酶的蛋白水解的抗性。此外,不溶性重組蛋白在包涵體中的分離要比可溶性蛋白容易得多。這些因素有利于使用細菌發酵來擴大高價值蛋白質的獲取。

什么是包涵體?
重組蛋白在宿主系統中高水平表達時,很容易形成不可溶、無生物活性的蛋白聚集體--包涵體。包涵體須經過變性溶解后,在適當條件下復性形成天然的構象,才能得到有生物活性蛋白。目前,大腸桿菌表達系統是生產重組蛋白最常用的表達體系,其重組蛋白的表達量可達細胞蛋白的50%,其他成分主要有一些雜蛋白(如 RNA聚合酶、核糖體組分、外膜蛋白等)、質粒 DNA、RNA 片斷和脂質、肽聚糖、脂多糖等成分。

如何從誘導的細菌培養物中分離和純化包涵體蛋白?艾美捷科技作為專業的生命科學領域解決方案供應商,為您推薦Norgen Biotek品牌的包涵體蛋白純化試劑盒。
| 產品名稱及描述 | 貨號 | 規格 | 產品展示 |
| ProteoSpin™ Inclusion Body Isolation Micro Kit | 10300 | 20次分析 |
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| ProteoSpin™ Inclusion Body Isolation Maxi Kit | 17700 | 4次分析 |
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ProteoSpin™包涵體分離純化試劑盒有助于篩選表達在大腸桿菌克隆的包涵體中的重組蛋白。該試劑盒包含特殊配方的試劑,可使用以下三個過程實現包涵體蛋白的快速和高質量純化:
1、裂解細菌細胞以釋放固體形式的包涵體;
2、純化的包涵體的溶解;
3、使用旋轉柱色譜法純化重組蛋白。
包涵體蛋白純化試劑盒特色與優勢:
1、操作快速簡便。
2、包涵體蛋白分離和純化的一體化解決方案。
3、完整的試劑盒包含細胞裂解液,包涵體溶解試劑,緩沖液和旋轉柱用以純化蛋白質。
4、純化的重組蛋白質可用于SDS-PAGE ,2D凝膠,Western blots,質譜分析和其他應用。
包涵體蛋白純化試劑盒,廠家測試:
| 貨號:10300
| 酸性蛋白分離:分離重組50kDa嵌合蛋白。 |
| 貨號:10300
| 堿性蛋白分離:分離重組RNaseA。 |
| 貨號:17700
| 分離堿性蛋白質時蛋白質沒有損失: 分離重組30kDa堿性蛋白質。1)是上樣,第2道是上樣后的流通道,3)是洗滌,4)是第一次洗脫,5)是第二次洗脫。 |
貨號:17700 | 分離酸性蛋白質時沒有蛋白質損失: 分離重組70kDa酸性蛋白質。 1)是上樣,第2道是上樣后的流通道,3)是洗滌,4)是第一次洗脫,5)是第二次洗脫。
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樣品使用量與產出數據參考:
| 試劑盒參數比較 | 貨號10300 | 貨號17700 |
| 培養物最大體積 | 1.5 mL | 100 mL |
| 最小洗脫體積 | 30 µL | 4 mL |
| 產量 | 1.5 mL培養物產量2 - 50 µg | 100 mL培養物產量高達12 mg |
| 純化時間 | 純化12個樣品需1小時 | 純化1個樣品需1小時 |
精彩文章鑒賞:
CP40 from Corynebacterium pseudotuberculosis is an endo-β-N-acetylglucosaminidase.BMC Microbiology. 2016.
Proteome of Human Calcium Kidney Stones.Urology.2010.
Norgen Biotek成立于1998年,公司總部位于加拿大,是一家著名全球化生物技術公司,生產基于專利技術的核酸和蛋白質純化及富集產品用于研究和診斷。Norgen Biotek 在2003年獲得加拿大國家研究委員會頒發的科技創新獎,是一家致力于樣品制備并獲得ISO 9001(產品質量)、ISO 13485(產品可用于商業化的醫療設備,包括用于體外診斷領域)和ISO 15189(可用于臨床檢測機分子診斷領域的研發能力)認證的生物科技公司。目前該公司的產品多達700余種,提供一流的樣品制備試劑盒,應用于基因組和蛋白組等不同的領域。
艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商保持著密切的合作關系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Mabtech、Solis BioDyne等,可以在第一時間為用戶提供最前沿的專業資訊、完備的產品及物流服務。
作為Norgen Biotek在中國的區域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的Norgen Biotek產品以及訂制服務。


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