檢測GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗體

GFP是綠色螢光蛋白（Green Fluorescent Protein）的簡稱，由238個氨基酸殘基組成。GFP蛋白質最早是由下村脩等人在1962年在一種學名Aequorea victoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質，在藍色波長范圍的光線激發下，會發出綠色螢光。GFP或其突變體EGFP標簽系統等被廣泛用于基因表達效率的檢測，以及和目的蛋白融合表達用于檢測目的蛋白的表達和分布。我們都知道GFP抗體能應用于GFP的表達檢測、純化以及定位分析。那么該如何檢測GFP其他的一些突變體，如EGFP、YFP、EYFP、CFP的表達和定位呢？

我們來看一下GFP標簽與其它突變體標簽的關系。YFP（Yellow Fluorescent Protein）是黃色熒光蛋白，其序列與GFP基本相同。YFP就是把Thr203以Tyr取代，這樣的GFP不發出綠色熒光，而發出較長波長的黃色熒光，也就是YFP。因此兩者最大的區別則是發射波長了，在其他序列上沒有區別。而EGFP是增強型的GFP，發生了雙氨基酸取代，Leu(亮氨酸)取代GFP上的Phe64(苯丙氨酸)，Thr(蘇氨酸)取代了GFP上的Ser65(絲氨酸)，與GFP相比，具有更強更穩定的綠色熒光。CFP（Cyan Fluorescent Protein）與此類似，也是GFP第66位上的酪氨酸Tyr被色氨酸（Thr）所取代的結果，發藍色熒光。由此可見，GFP標簽與其它突變體GFP、YFP、EYFP、CFP的序列非常的類似，只有1-2個氨基酸殘基的變化。

Abbkine GFP標簽抗體（#A02020）用于IF實驗	Abbkine GFP標簽抗體（#A02020）用于WB實驗，1道為陰性對照，2道為1:1000倍稀釋

我們先看一下Abbkine的單克隆GFP抗體——Anti-GFP Tag Monoclonal Antibody（貨號#A02020），其免疫原是KLH偶聯的全長GFP熒光蛋白，由于EGFP、YFP、EYFP、CFP得N末端序列與GFP幾乎完全一致，因此從免疫原上來說，GFP與EGFP、YFP、EYFP、CFP沒有區別。更重要的是，Abbkine對于該單克隆抗體還進行了明確的驗證試驗，試驗也表明該Anti-GFP Tag Monoclonal Antibody均能與GFP、YFP、EYFP、CFP等突變體有交叉反應，可以用于GFP、YFP、EYFP、CFP等熒光蛋白的表達定量、定位分析和檢測。Abbkine該GFP標簽抗體（貨號#A02020）的另一個優勢是，可用于的試驗類型很多，除了基本的WB、ELISA試驗外，還可以用于免疫細胞化學、免疫熒光（ICC/IF）、免疫共沉淀（IP）等。該抗體的效價很高，Abbkine的推薦WB起始稀釋比率為1:1000，實際應用于中還能有更優異的表現。因此，Abbkine的Anti-GFP Tag Monoclonal Antibody （貨號#A02020）不僅可以用于GFP，還能應用于GFP其他的一些突變體，如EGFP、YFP、EYFP、CFP的表達和定位等實驗。更詳細信息，請點擊：Abbkine GFP標簽抗體。

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