Mabtech暢銷特色B細胞ELISpot檢測工具

酶聯免疫斑點實驗（enzyme linked immunospot assay.ELISpot）是一種在96孔板內的一百萬個細胞中實現對單個分泌細胞進行定量檢測的新型的免疫酶技術。靈敏度高，易操作，成本相對流式細胞術較低，已被廣泛應用于癌癥研究，疾病探索以及疫苗研發等領域。

ELISpot原理：將細胞置于包被有特異性抗體的96孔板中培養，在有刺激的條件下，細胞分泌的細胞因子或免疫球蛋白會被包被抗體捕獲。移除細胞后，被捕獲的細胞因子可進一步使用生物素標記的二抗來標識，其后再與酶標記的親和素作用，并加入底物使其呈色，有反應作用的細胞會留下直徑大小不等的染色斑點。

具體步驟：

1.加入細胞到含有（或不含）刺激物中培養；

2.陽性細胞開始分泌細胞因子，細胞因子就近被包被抗體捕獲；

3.移出細胞，清洗板子，加入生物素標記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-抗體”夾心結構；

4.為了觀察膜上斑點的形成，加入酶標記的親和素；

5.加入顯色底物，在酶的催化分解下，生成不可溶的色素，就近沉淀在局部的膜上形成斑點；

6.斑點計數（可人工計數，也可用自動讀板儀計數），數據處理，結果分析。

B細胞ELISpot

B細胞ELISpot是對分泌的免疫球蛋白進行直接檢測的有力工具。可用來直接計數抗體分泌細胞（ASCs）和長期記憶B細胞。相對于常用的細胞流式而言，B細胞ELISpot能在十萬個細胞中實現對單個抗原特異性B細胞進行定量檢測，因而具有極高的靈敏度。B細胞ELISpot的主要應用于檢測B細胞對感染和疫苗接種引起的反應。

B細胞ELISpot檢測需要捕獲和檢測抗體或抗原，采用夾心法對抗體分泌細胞ASCs進行計數?？侷g B細胞ELISpot（A）捕獲和檢測所有的ASC抗體，會以兩種方式同時進行。一種是反向ELISpot（B），利用標記抗原進行檢測；另外一種是傳統的ELISpot (C)：將抗原包被在孔板上，利用標記抗體進行檢測。不管是哪種方式，每一個斑點都只對應一個細胞。

反向ELISpot在檢測抗原特異性細胞方面具有幾大優勢：它產生的斑點更加清晰，同時不存在抗原變性的風險；此外，它還大大減少了每次檢測所需的抗原數量。

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【品牌介紹】

Mabtech公司于1986年創辦于瑞典，是一家歐洲的集研究，開發，銷售，技術支持為一體的高科技免疫生物技術公司。Mabtech公司始終專業致力于研發新的單克隆抗體，生產創新的免疫試劑和銷售高品質的全配套的免疫試劑盒。公司核心業務是致力于優化發展酶聯免疫斑點法技術 (ELISpot)、熒光免疫斑點法技術 (FluoroSpot) 和酶聯免疫吸附試驗技術 (ELISA) 等免疫學方法。公司開發和生產多種針對細胞因子，免疫球蛋白和載脂蛋白的單克隆抗體，用于生命科學研究中的體外應用。Mabtech的試劑盒可用于研究感染性疾病，癌癥，過敏，移植等免疫反應，通常用作疫苗試驗中的監測工具。此外，還生產用于獸醫和心血管研究的試劑盒。

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