CD系列抗體專題1——熒光標記CD3抗體

發布者：艾美捷科技發布時間：2021-09-01

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CD3是一種蛋白質復合物，通常在所有成熟T細胞的表面表達。它的主要功能是作為T細胞共同受體，促進細胞毒性T細胞（CD8⁺T細胞）和輔助T細胞（CD4⁺ T細胞）的活化，并最終幫助形成獲得性免疫反應。作為T細胞活化的一個組成部分，CD3已成為藥物開發的一個有潛力的指標，針對CD3開發的治療性單克隆抗體 (mAb)，可作為一種自身免疫疾病和移植排斥的免疫療法，其中最著名的就是奧昔組單抗，它被開發用于治療1型糖尿病和自身免疫性疾病。

CD3蛋白質復合物.png

在流式細胞分析中，人CD3通常被用作將T細胞與其他淋巴細胞區分開來的譜系特異性標記物。CD3 對T細胞的特異性與其在T細胞發育的所有階段均可出現結合的特性，使其成為檢測健康T細胞和T細胞癌（例如白血病、淋巴瘤）的理想標志物。在免疫組織化學研究中，CD3是組織切片中T細胞的免疫組化標志物。

CD3介紹：

目錄	價值
同義詞	T3、OKT3、Leu4
細胞定位	細胞膜
細胞表達	T細胞、雙陰性胸腺細胞（例如 CD4^- 和CD8^-）、γ/δ T細胞、NKT細胞、巨噬細胞
受體類型	免疫球蛋白 (IgG) 超家族
配體	與 MHC 結合的肽抗原
相關信號通路	T細胞受體表達和T細胞信號通路
功能	T細胞標志物、T細胞受體表達和T細胞信號傳導

CD3 蛋白復合物：

由于其胞質尾短，T 細胞受體 (TCR) 缺乏在肽主要組織相容性復合物 (pMHC) I 類或 II 類分子的抗原識別時發出信號的能力。為了激活啟動免疫細胞激活的必要下游通路，TCR 需要由稱為 CD3 蛋白的信號分子復合物啟動細胞內信號。

CD3結構：

CD3 蛋白復合物由四個恒定鏈（CD3ε、CD3δ、CD3γ 和 CD3ζ）組成，它們組成一個N端細胞外域和一個跨膜結構域，并且在所有T細胞中都是相同的。N端細胞外域由兩個異源二聚體結構域CD3εγ和CD3εδ 組成，跨膜結構域由單個同源二聚體CDζζ組成。

CD3及其在疾病中的作用：

編碼 CD3 亞基的基因突變可導致嚴重聯合免疫缺陷 (SCID)，這是一種罕見的常染色體隱性遺傳疾病，其特征是T和B淋巴細胞分化和功能嚴重缺陷。CD3亞基的缺陷與以下因素有關：

CD3δ和CD3ε 缺失：與嚴重的αβ細胞淋巴細胞減少相關，導致T^- B⁺ NK⁺ SCID 表型。

CD3ε 缺失：導致T細胞發育完全阻斷。

CD3γ缺失：導致部分T細胞免疫缺陷。

CD3ζ缺失：與免疫缺陷 25和系統性紅斑狼瘡 (SLE) 相關。

組成人的CD3蛋白復合物的多肽鏈：CD3ε、CD3δ、CD3γ 和 CD3ζ

CD3鏈	相對分子量	糖基化	ITAM 的數量	基因
CD3ε	20kDa	非糖基化多肽鏈	1	CD3E（人染色體11帶q23）
CD3δ	20kDa	糖基化多肽鏈	1	CD3D（人染色體11帶q23）
CD3γ	25-28kDa	糖基化多肽鏈	1	CD3G（人染色體11帶q23）
CD3ζ	17 kDa	非糖基化多肽鏈	3	CD247（人染色體1帶q22-q25）

CD3 抗體

單克隆CD3抗體可結合CD3/T細胞抗原受體復合物的ε鏈，經常用于流式細胞和免疫熒光應用，以識別表達CD3的免疫細胞亞群。已知表達CD3表面標志物的細胞包括約60-85% 的正常外周血淋巴細胞、約65-85%的胸腺細胞以及小腦和胃壁細胞的浦肯野細胞。

在這里，我們給大家提供了各類染料標記的CD3抗體，這些抗體通過親和層析純化，并在最佳條件下與各種熒光團結合，首先是我們的iFluor系列染料：

iFluor染料-明亮、光穩定的染料，適用于流式細胞術 (FACS)、熒光成像和體內成像應用。

iFluor 染料標記的CD3抗體：

下表列出了可用于流式細胞術 (FACS) 和熒光成像的iFluor染料標記的人CD3抗體的熒光特性。用iFluor染料制成的偶聯物具有出色的亮度和光穩定性，優于 Alexa Fluor 偶聯物和。

iFluor 染料標記的CD3抗體：

熒光標記	貨號	Ex （nm）	Em (nm)	ε	Φ	CF 260 nm	CF 280 nm
iFluor350	10030010	344	448	20,000	0.95	0.83	0.23
iFluor405	10030020	402	425	37,000	0.91	0.48	0.77
iFluor430	10030030	433	495	40,000	0.78	0.68	0.3
iFluor450	10030040	451	502	40,000	0.82	0.45	0.27
iFluor488	10030050	491	516	75,000	0.9	0.21	0.11
iFluor514	10030060	527	554	80,000	0.83	0.25	0.11
iFluor532	10030070	543	563	90,000	0.68	0.26	0.16
iFluor546	10030080	541	557	100,000	0.67	0.25	0.15
iFluor555	10030090	556	569	100,000	0.64	0.23	0.14
iFluor560	100300A0	559	571	130,000	0.57	0.048	0.069

Note：

1.Ε=最大吸收波長處的摩爾消光系數（單位 = cm -1 M -1）（下同）。

2.Φ =水性緩沖液（pH 7.2）中的熒光量子產率（下同）。

3.260 nm處的CF是用于消除染料對260 nm處吸光度的影響的校正因子（用于寡核苷酸和核酸標記）（下同）。

4.280nm處的CF是用于消除染料對280 nm處吸光度的貢獻的校正因子（用于肽和蛋白質標記）（下同）。

上述每一種抗體都可以提供HIT3b，SK7，UCHT1，HIT3a，OKT-3這幾種克隆號，每種克隆號對應的

同種型和應用類型如下：

免疫原	類型	物種反應性	宿主，同種型	克隆號	應用類型
識別 CD3ε 鏈	單克隆	人	小鼠，IgG1	HIT3b	FC、IHC-F、IF
識別 CD3ε 鏈	單克隆	人	小鼠，IgG1，κ	SK7	FC、IHC
識別 CD3ε 鏈	單克隆	人	小鼠，IgG1，κ	UCHT1	FC、FN、IHC-F、ICC、IP、WB
識別 CD3ε 鏈	單克隆	人	小鼠，IgG2a，κ	HIT3a	FC、FN、IHC-F、IP
識別 CD3ε 鏈	單克隆	人	小鼠，IgG2a，κ	OKT-3	FC

應用縮寫說明：FC = 流式細胞術；FN = 功能測定；IF = 免疫熒光；IHC = 免疫組織化學；IHC-F = 免疫組織化學（冷凍）；ICC = 免疫細胞化學；WB = 蛋白質印跡；IP = 免疫沉淀。

除了iFluor 熒光團外，我們還提供以下4大類熒光標記的CD3抗體，他們分別是：

mFluor染料：明亮、光穩定的染料，針對流式細胞術 (FACS) 應用進行了優化。

熒光團	Ex (nm)	Em (nm)	ε	Φ	CF 260 nm	CF 280 nm
mFluor UV375	354	388	35,000	0.94	0.099	0.138
mFluor Violet 450	406	445	25,000	0.92	0.338	0.078
mFluor UV460	362	456	15,000	0.86	0.35	0.134
mFluor Violet 500	426	497	35,000	0.81	0.769	0.365
mFluor Violet 510	409	504	30,000	0.86	0.464	0.366
mFluor Violet 540	400	532	15,000	0.64	1.392	0.529
mFluor Blue 570	552	564	120,000	0.08	0.228	0.179
mFluor Green 620	521	617	50,000	0.06	0.895	0.569
mFluor Yellow 630	546	625	110,000	0.01	0.283	0.413
mFluor Red 700	657	694	250,000	0.029	0.135	0.127

Alexa Fluor染料：適用于流式細胞術 (FACS) 和熒光成像應用。

熒光團	Ex (nm)	Em (nm)	ε	Φ	CF 280 nm
Alexa Fluor 350	343	441	19,000	N/D	0.19
Alexa Fluor 488	499	520	73,000	0.92	0.11
Alexa Fluor 555	553	568	155,000	0.1	0.08
Alexa Fluor 594	590	618	92,000	0.66	0.56
Alexa Fluor 647	650	671	270,000	0.33	0.03
Alexa Fluor 680	681	704	183,000	0.36	0.05
Alexa Fluor 700	696	719	205,000	0.25	0.07
Alexa Fluor 750	752	776	290,000	0.12	0.04

經典染料：適用于流式細胞術 (FACS) 和熒光成像應用。

熒光團	Ex (nm)	Em (nm)	ε	Φ	CF 280 nm
Pacific Blue	404	455	46,000	0.78	0.2
FITC	491	516	73,000	0.79	0.254
Pacific Orange	400	551	25,000	N/D	0.6
TRITC	544	570	85,000	0.1	0.34

藻膽蛋白和串聯染料：用于流式細胞術 (FACS) 和多參數分析的高亮度染料。

熒光團	Ex (nm)	Em (nm)	ε	激光 (nm)
PE	566	574	1,960,000	488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Texas Red	567	615	1,960,000	488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Alexa Fluor 610	567	627	1,960,000	488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Cy5	565	666	1,960,000	488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-iFluor 647	569	666	1,960,000	488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Alexa Fluor 700	566	721	1,960,000	488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Cy7	566	778	1,960,000	488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-iFluor 750	566	778	1,960,000	488 nm, 532 nm, 561-568 nm
APC	651	660	700,000	633-647 nm
APC-iFluor 700	651	710	700,000	633-647 nm

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