[干冰]連接特異性UbiTest-磁珠管洗脫試劑盒，真正證明多泛素化，無需質譜

UbiTest試劑盒用于確定目標蛋白是否被多泛素化。這一強大的平臺改進了研究蛋白質泛素化最常用的方法：免疫沉淀和Western blot分析。然而，在免疫印跡步驟中，底物抗體常常與底物的多泛素化形式相互作用不同。這是由于表位遮蔽、親和力降低或選擇性變化所導致的。一種更明確的證明蛋白質泛素化的方法是，在免疫印跡分析之前，將免疫沉淀與廣譜去泛素化酶（DUB）消化相結合。經過DUB處理后，目標蛋白（POI）的信號增加，這清楚地表明該蛋白已被泛素化，即使在未處理的樣本中沒有明顯的反應性也是如此。為了避免由于POI免疫反應性變化而可能產生的問題，UbiTest檢測利用TUBEs來下拉多泛素化蛋白。TUBEs（串聯泛素結合實體）是經過工程改造的串聯泛素結合結構域，其對四泛素的解離常數在納摩爾范圍內。TUBE1已被證明能夠結合所有8種連接類型。

確定目標蛋白上多泛素化的連接類型是具有挑戰性的。傳統方法要么通過質譜（MS），要么使用連接特異性抗體進行Western blot。LifeSensors開發了一種更明確的方法，通過在免疫印跡分析之前使用連接特異性DUB來證明蛋白質的多泛素化連接類型。經過K48/K63特異性DUB處理后，未修飾POI對應的條帶信號增加，清楚地表明該蛋白被K48/K63多泛素化。

艾美捷[干冰]連接特異性UbiTest-磁珠管洗脫試劑盒#UM-0412M-1000組成：

除了泛選擇性UbiTest磁珠洗脫試劑盒的組分外，該試劑盒還包含：  

K48連接特異性DUB：25 ug，10 uM  

K63連接特異性DUB：35 ug，10 uM  

應用：

從細胞和組織提取物中方便地一步下拉多泛素化蛋白  

分離多泛素化蛋白用于蛋白質組學研究  

確認目標蛋白的多泛素化及其連接類型  

真正證明多泛素化——無需質譜  

方便比較處理樣本之間的多泛素化水平  

方便對多個POI進行篩選  

無需底物純化