T7 RNA聚合酶適用于合成標記/未標記的高特異性 RNA 探針

T7 RNA聚合酶（T7 RNA Polymerase）是一種 RNA聚合酶，分子量約99kDa。專門催化5'→3'方向的 RNA形成過程。T7RNA聚合酶具有高度啟動子專一性，且只會轉錄T7 噬菌體中位于T7啟動子下游的的DNA或DNA復制品。

此酵素在合成RNA的過程中，需要DNA模板與 鎂離子（Mg）作為 輔因子。 牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）及 精胺（spermidine）對此酵素具促進效果。與細菌的RNA聚合酶的差異之一，在于T7RNA聚合酶不受 抗生素 利福平（rifampicin）抑制。

艾美捷T7 RNA聚合酶（#C-BSM0124）適用范圍:

1. 合成單鏈 RNA，包括 mRNA，siRNA，gRNA 等各類 RNA 的前體。

2. 合成標記或未標記的高特異性 RNA 探針。

3. 利用帽子類似物合成加帽的 mRNA。

T7 RNA聚合酶可分為：常規型和耐熱型。常規型T7 RNA聚合酶可在37℃對模板進行高效體外轉錄，而耐熱型T7 RNA聚合酶可在更高的溫度下（37-52℃）進行體外轉錄。

T7 RNA聚合酶使用方法：

推薦的反應條件：

在37°C下培養1小時。如果轉錄物長度小于300nt，反應時間可以延長至2-16小時。反應結束后，在上述20μl反應混合物中加入1μl雙脫氧核糖核酸酶，并在37°C下孵育15分鐘以移動DNA模板

備注：

1.模板DNA的純度對于體外轉錄至關重要。在質粒DNA提取過程中引入的RNase A殘基會顯著影響轉錄RNA的質量。建議使用OD260/280比例為1.8-2.0的高純度RNase游離質粒。

2.模板DNA可以通過線性化的環狀質粒或PCR獲得。模板DNA的上游區域應包含T7啟動子序列，下游區域應具有鈍端或編碼鏈上的5'突出部分。

3.為了您的安全和健康，請在進行實驗時穿戴實驗服、一次性手套和口罩。

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