永生化小鼠腸肌成纖維細胞解凍協議&文獻參考

腸上皮細胞為抵御通過腔管進入身體的細菌、抗原和有毒物質提供了一個保護屏障。這些細胞受到調節，以分化和增殖來建立它們的保護功能。已有研究表明，位于上皮細胞下方的腸肌成纖維細胞在調節腸上皮細胞方面發揮作用。

永生化小鼠腸肌成纖維細胞是從C57BL/6J小鼠的結腸粘膜中分離出來的，并用SV40大T抗原轉染。它保留了原始的肌成纖維細胞表型，并表達α-平滑肌肌動蛋白、波形蛋白和Ⅰ型膠原。也檢測到與免疫反應相關的蛋白，如TLR-4、CD14、MD2和IκBα。此外，這些細胞對脂多糖（LPS）處理有反應，能夠引發炎癥反應，導致IκBα降解和p38 MAPK磷酸化。它是研究腸損傷、纖維化、炎癥、組織修復和腸組織免疫調節的寶貴工具。使用西方印跡（Western blot）和免疫熒光染色來確定細胞標記和蛋白表達。

艾美捷abm永生化小鼠腸肌成纖維細胞基本參數：

貨號：T0565

名稱：永生化小鼠腸肌成纖維細胞

生物體：小鼠 (M. musculus)

組織：腸

供體歷史：C57BL/6J 小鼠

生長特性：貼壁，紡錘形

細胞類型：永生化細胞

儲存條件：液氮的氣相，或低于-130°C

運輸條件：干冰運輸

產品格式：冷凍

預期用途：本產品僅用于實驗室研究。不適用于任何動物或人類的治療用途，任何人類或動物的消費，或任何診斷用途。

生物安全等級：II

分析證書：有關批次特定的測試結果，請參考可在 www.abmgood.com 查找的適用的分析證書。

生長條件：需要使用PriCoat? T25燒瓶（G299）或應用細胞外基質（G422）以促進細胞對培養容器的粘附。PriGrow III (TM003) + 10% FBS + 1% 青霉素/鏈霉素溶液（G255），37.0°C，5% CO?

拆包和儲存說明：

1. 目視檢查包裝容器是否有泄漏或破損的跡象。

2. 立即將干冰包裝中的冷凍細胞轉移到低于-130°C的溫度中，Z好在液氮氣相儲存，直到準備使用。

為了確保Z高的活性水平，在收到后盡快解凍小瓶并開始培養。如果需要繼續儲存，小瓶應僅儲存在低于-130°C或液氮氣相中。不要在-70°C下儲存，因為這會導致活性喪失。

永生化小鼠腸肌成纖維細胞解凍協議：

1. 在37°C水浴中快速搖晃解凍細胞（Z多2分鐘）。瓶蓋應保持在水面之上，以最小化污染風險。

2. 用70%乙醇噴灑并擦拭瓶身外部以消毒。從這一點開始，所有操作應嚴格在生物安全柜內使用無菌條件進行。

3. 將細胞懸液轉移到含有5ml預加熱的完全生長培養基的15ml無菌圓錐管中。以125xg離心細胞5-7分鐘。

4. 在不干擾細胞沉淀物的情況下吸去上清液。將細胞沉淀物重新懸浮在推薦的預加熱的完全生長培養基中，并分裝到T25培養瓶中。

5. 在推薦的條件下培養細胞。

永生化小鼠腸肌成纖維細胞文獻參考：

Kawasaki, H., Ohama, T., Hori, M., & Sato, K. (2013). Establishment of mouse intestinal myofibroblast cell lines. World journal of gastroenterology, 19(17), 2629–2637.