Spherotech/艾美捷--順磁性粒子STN-1：顆粒涂層程序技術說明

制備SPHERO?磁性顆粒 通過在單分散（即大小均勻）的聚苯乙烯芯顆粒上涂覆一層磁鐵礦和聚苯乙烯。因此，Spherotech--SPHERO?磁性粒子是球形的，本質上是順磁性的。它們的大小也非常均勻。這些磁性顆粒的磁鐵礦含量可以調節，但一般來說，對于1微米顆粒，磁鐵礦含量約為10%至15%。磁性顆粒可以很容易地從懸浮液中磁性分離出來。這些顆粒從磁鐵中取出時變得無磁性，即使在反復暴露于強磁場后也不會保留任何可檢測的磁性。SPHERO?磁珠可用于細胞分離、親和純化、DNA探針測定、磁珠EIA等。

目前，有幾種將生物配體附著在聚苯乙烯顆粒上的方法。這些方法包括吸附到普通聚苯乙烯顆粒上，共價附著在表面功能化顆粒上，以及將目標配體附著在預先包被結合蛋白（如鏈霉親和素、蛋白 A 或蛋白 G）的顆粒上。

以下信息解釋了配體與聚苯乙烯顆粒連接的通用方案。這些協議易于優化，可滿足特定應用的要求。以下方案由 Spherotech 開發，以方便 SPHERO? 微粒用戶。它們只能用作初始條件。Spherotech 鼓勵通過改變緩沖液、pH 值或試劑濃度來優化包被條件。

通常，多克隆抗體通過吸附包被到聚苯乙烯顆粒上，而不使用任何偶聯劑。多克隆抗體與聚苯乙烯顆粒的結合力很強。但是，應注意不要使抗體超載到顆粒上。如果發生過載，包被的抗體將在儲存過程中發生浸出。這是由于與抗體分子與聚苯乙烯顆粒表面的相互作用相比，抗體分子之間的相互作用較弱。如圖1所示，被動吸附的合適抗體與顆粒比為62.5μg/mL的0.5%w/v（5.0mg固體/mL）的0.8μm聚苯乙烯顆粒1。

艾美捷Spherotech--Sphero技術說明：

使用被動吸附的顆粒涂層

使用EDC和共價偶聯的具有配體或蛋白質的氨基顆粒

羧基顆粒與親和素或其他蛋白質使用EDC共價偶聯

使用兩步EDC偶聯協議的共價偶聯

使用親和偶聯的生物素化蛋白的親和素顆粒

使用溴化氰 （CNBr） 將蛋白質與羥基顆粒共價偶聯

二甲氨基顆粒與DNA使用離子相互作用偶聯

使用 SPDP 修飾氨基蛋白共價偶聯的配體

多糖的高碘酸氧化和與氨基顆粒的偶聯

具有氨基修飾寡核苷酸的羧基聚苯乙烯顆粒

Spherotech公司是全球知名的微球產品生產商之一。Beckton Dickinson(BD)公司即用Spherotech的Rainbow熒光微球來對其流式細胞儀進行靈敏度的校驗。Spherotech公司生產的微球廣泛的應用于生物醫學研究和診斷，包括免疫熒光和免疫酶學檢測等。其微球適用于熒光顯微鏡技術、激光共聚焦(Confocal)技術、流式細胞術、影像細胞術、磁性細胞分離技術、磁珠酶免測定法(EIA)等多種檢測方法。Spherotech常規生產高質量的乳膠微球、熒光微球、順磁性微球、鐵磁性微球和多種有色微球，這些微球表面可根據應用的需要添加不同的功能基團(如羧基和氨基等)。此外，Spherotech公司還生產各種包被有抗體或配體，如親合素、鏈霉親合素和生物素等的微球，用于免疫學的研究和臨床。  艾美捷科技是Spherotech的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。