QKine高純度熱穩定重組FGF2-G3(145個氨基酸)蛋白(Qk052)方案

FGF2-G3（145aa）蛋白是FGF-2（bFGF）的耐熱工程形式。Qk052包含145個氨基酸形式的FGF-2（Qk025），具有Dvorak等人在2018年開發的9個氨基酸置換。這將蛋白質的功能半衰期從<10小時（野生型）增加到>7天（FGF2-G3 145 aa）。

FGF2-G3用于B8培養基（Kuo等人，2019），用于無周末、高同質性誘導多能干細胞培養。這種新的145aa耐熱FGF-2蛋白允許直接比較使用FGF-2 145aa（Qk025）用于化學定義的干細胞和類器官培養基以及培養肉培養基開發的系統中的功效。

高純度16 kDa生物活性FGF2-G3 145 aa蛋白，無動物來源（AOF），無載體蛋白，無His標簽。

艾美捷QKine重組FGF2-G3(145個氨基酸)蛋白(Qk052)：

摘要：高純度熱穩定FGF2-G3蛋白，包含145氨基酸形式的FGF-2（Uniprot編號：P09038），并含有九個穩定化的氨基酸替換

純度>98%，通過SDS-PAGE定量密度測定法檢測

分子量為16 kDa

在大腸桿菌中表達

無動物源性（AOF）且無載體蛋白

在英國劍橋的實驗室生產

從Tris/NaCl/CyS/甘露醇中凍干

溶解方法：使用純水溶解，濃度大于100 ?g/ml，分裝為單次使用量，可加入載體蛋白，短期保存于-20°C，長期保存于-80°C

特色應用：

誘導多能干細胞、胚胎干細胞和間充質干細胞的擴增

細胞擴增

進一步的質量檢測：

質譜檢測：單一物種，具有預期的質量

分析型反相色譜：呈現單一尖銳峰

內毒素檢測：內毒素含量小于0.005 EU/μg蛋白（低于檢測限）

從原液瓶中的回收率：大于95%

活性檢測：使用Promega血清反應元件熒光素酶報告基因檢測法（*）在轉染的HEK293T細胞中測定FGF2-G3（145氨基酸）的活性。半數有效濃度（EC??）為101 pg/ml（6.2 pM）。細胞以三份重復處理，加入FGF2-G3（145氨基酸）的系列稀釋液處理3小時。測量螢火蟲熒光素酶的活性，并與對照組的海腎熒光素酶活性進行標準化處理。數據來源于Qk052批次號#104339。*Promega pGL4.33[luc2P/SRE/Hygro] #E1340

純度檢測：FGF2-G3（145氨基酸）在非還原條件（NR）下以16 kDa的主要條帶遷移?？梢钥吹缴倭慷垠w（高分子質量條帶）。在還原條件（R）下，僅可見16 kDa的條帶。未見其他污染蛋白條帶。純化的重組蛋白（3 ?g）使用15%（w/v）SDS-PAGE在還原條件（+β-巰基乙醇，R）和非還原條件（NR）下進行分離，并用考馬斯亮藍R250染色。數據來源于Qk052批次號#104339。

文獻參考：

Refined home-brew media for cost-effective, weekend-free hiPSC culture and genetic engineering.

In Open Research Europe 2024 by Truszkowski, L., Bottini, S., Bianchi, S. et al.

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