AAT Bioquest丨艾美捷代理PowerStyramide信號放大（PSA）技術說明

AAT Bioquest-PowerStyramide信號放大（PSA）是一種新型酶促放大技術，用于檢測細胞和組織中的低豐度靶標。該技術將iFluor染料卓越的亮度與光穩定性，與多聚HRP介導的Styramide放大系統相結合，產生的熒光信號在精度和靈敏度上均顯著優于傳統免疫組化、免疫細胞化學及原位雜交技術（提升超100倍）。艾美捷作為AAT Bioquest中國區代理商，分析一下其技術優勢和多重分析應用：

技術原理

PSA技術與酪酰胺信號放大（TSA）類似，均利用辣根過氧化物酶（HRP）作為報告酶，催化標記Styramide底物在靶蛋白或核酸序列原位的共價沉積。在過氧化氫存在下，HRP將標記Styramide轉化為高反應性、短壽命的自由基，這些自由基可快速與酶位點及其鄰近的酪氨酸殘基結合。Styramide自由基的反應活性顯著高于酪酰胺自由基，使得PSA成像較傳統TSA標記更快、更穩定且更靈敏。由于標記Styramide集中沉積在HRP靶點周圍，有效避免了擴散導致的分辨率損失。該技術可靈活應用于任何可整合HRP的實驗方案，包括IHC、ICC、IF、原位雜交及ELISA等。

圖：PSA檢測方法在靶抗原免疫標記中的示意圖：通過傳統檢測方法，使用未標記一抗與HRP標記二抗處理細胞或組織樣本；HRP催化標記Styramide轉化為高反應性自由基，并共價結合于酶位點及鄰近酪氨酸殘基。

技術優勢

PSA成像系統通過每個HRP標記快速催化并共價沉積多個Styramide底物，實現信號放大，具有以下顯著優勢：

-超敏檢測：對低豐度靶標的檢測靈敏度較傳統IHC/ICC/IF方法提升超100倍

-高強度信號：熒光強度達到酪酰胺信號的10-50倍

-多重兼容性：可與其他熒光標記物、染色技術及PSA成像試劑盒聯用，實現多重分析

-高效反應：PSA自由基更高反應活性，可在保證靈敏度與分辨率的同時加速實驗進程

-抗體節約：顯著降低一抗用量即可達到同等檢測靈敏度

-操作便捷：試劑盒提供100次測試用量，無需復雜操作流程

靈敏度提升實踐

在免疫染色應用中，PSA成像技術允許在保持檢測靈敏度的前提下顯著提高一抗稀釋倍數。這不僅降低了非特異性背景信號，還能克服因固定效果不佳或靶標表達量過低導致的標記不充分問題。

多重分析應用

PSA系統專為多重檢測設計，可與其他熒光標記物、細胞組織染色技術及其他PSA成像試劑盒兼容，實現多靶標同步可視化。相較于TSA和熒光二抗，PSA更低的檢測閾值使得即使使用同一宿來源的兩種一抗，也能在避免信號串擾的前提下實現雙靶標檢測。其兼容范圍包括：

-熒光標記物與復染劑（如DAPI,Hoechst）

-熒光蛋白（如GFP,YFP,RFP）

-其他Styramide試劑與PSA成像試劑盒

-酪酰胺試劑及其成像試劑盒

靈活的工作流程適配性

PSA成像技術可適配任何支持HRP整合的實驗方案，并與免疫應用中常見的樣本類型及熒光成像平臺兼容。當與傳統IHC、ICC、原位雜交及流式細胞術結合時，可在不損失圖像分辨率或不增加背景噪聲的前提下顯著提升檢測靈敏度。

PSA標準操作流程

1.樣本預處理：對細胞或組織樣本進行固定、透化及封閉處理

2.一抗孵育：與未標記一抗、生物素化一抗或生物素化核酸探解育

3.HRP標記：加入HRP標記二抗或HRP-鏈霉親和素復合物

4.信號放大：加入iFluor?染料標記Styramide工作液，進行HRP催化沉積

5.信號檢測：封片后通過相應成像系統進行信號采集

該技術通過優化信號放大機制，為生命科學研究提供了更高效、更精準的低豐度靶標檢測解決方案。

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