新PSD95抗體對標準PFA固定的組織和細胞在免疫組化(IHC)和免疫細胞化學 (ICC)上的完美結果

NanoTag Biotechnologies 和 Synaptic Systems 介紹了第一個PSD95 FluoTag-X2 抗體，它在標準免疫染色應用方面例如免疫組織化學(IHC) (圖1) 和免疫細胞化學(ICC) (圖 2)展現出了穩固而可靠的結果。并且，在附加的抗原提取步驟中，它對經PFA / 福爾馬林固定的，來源于大鼠和小鼠的組織和細胞沒有任何的要求。

突觸后致密區(PSD)

突觸后致密區 (PSD) 是位于突觸后膜，并列于突觸前活躍區的一個特殊蛋白致密區。起初，通過電子顯微鏡，他被鑒定為位于突觸后膜上的電子致密結構(圖3)。突觸后致密區在突觸間隙充當支架結構，使神經遞質受體聚集在靠近突觸前釋放神經遞質的位置(Banker et al., 1974; Ziff, 1997; Dosemeci et al., 2016)。

由于大腦區域，活躍狀況，突觸成熟和一些神經變性的疾病，突觸后致密區的大小和成分也有所不同(Meyer et al., 2014; Vyas and Montgomery, 2016)

圖3：大鼠海馬結構突觸的電子顯微斷層掃描圖片

N. Holderith PhD 博士生

Laboratory of Cellular Neurophysiology,

Institute of Experimental Medicine

Budapest

PSD95 (SAP90)

PSD95 (突觸后致密區蛋白 95) 也稱為SAP90 (突觸關聯蛋白 90)或者由DLG4基因編碼的Disks large homolog 4 (Statthakis et al., 1997)。

與其鄰近親屬PSD93, SAP102和SAP97，一同屬于MAGUK 蛋白超級家族，并且共享PDZ, SH3和GUK結構域的特性(Woods and Bryant, 1993) (見圖4)。

圖4：PSD95蛋白的3D結構?；赑yMOL 上對PDB 1be9的描述。

PSD95和PSD93 是PSD的關鍵組分(Hunt et al., 1996; Kennedy, 1997)，可以形成包含數百個拷貝的多聚體支架，聚集神經遞質受體、離子通道和其他伴隨的信號蛋白(Dosemeci et al., 2016)。

出于此原因， PSD95是一個重要的，常用的標記蛋白，用于神經系統中突觸后端的特定免疫標記，包括免疫細胞化學 (ICC)和免疫組織化學(IHC)。然而，由于多聚體的，緊湊且致密的結構，抗體表位經常被巨大的完整IgG抗體分子所掩蓋或由于空間位阻而難以接近?？乖迯头椒ɑ蛘咛厥庹{整過的固定實驗方案可以改善結果，但由于附加的組織處理步驟，對于其它抗體在多路復用實驗中的應用可能會是一個限制。

The PSD95 FluoTag

新的PSD95 FluoTag N3702是一個單域抗體(sdAb)，通常被稱為納米抗體，由我們的合作伙伴公司NanoTag Biotechnologies所研制開發。這種重組駱駝源抗體僅由羊駝重鏈抗體的一個抗原結合位點組成。只有約僅僅15 kDa，這種FluoTag比傳統的IgG抗體分子大約小10倍。由于非常小的尺寸，即使在標準的4% PFA灌注固定和后固定組織中，這種PSD95 FluoTag也可以穩定地訪問其表位。這種組織制備方法由于確保了組織形態的極佳保存，并與大量可用的研究抗體兼容，所以通常用于振動和冷凍切片的免疫組化染色。

此外，在對人工培養神經元細胞的免疫組化染色中發現，新引入的PSD95 FluoTag在經PFA固定的細胞上表現Z越(圖 2)。

它的單價結合特性，即每個FluoTag與確定數量的熒光團分子結合，使其成為定量分析的理想試劑。

為了確保Z大范圍的應用符合您的需求，我們新的PSD95 FluoTag可與一個廣泛的熒光分子團共軛(見下表)

PSD95 sdAb - FluoTag-X2 - 所有變異型清單

參考文獻：

Banker et al. 1974: Proteins of the postsynaptic density. PMID: 4419608

Dosemeci et al. 2016: The Postsynaptic Density: There Is More than Meets the Eye. PMID: 27594834

Hunt et al. 1996: PSD-95 is associated with the postsynaptic density and not with the presynaptic membrane at forebrain synapses. PMID: 8778289

Kennedy 1997: The postsynaptic density at glutamatergic synapses. PMID: 9185308

Meyer et al. 2014: Balance and stability of synaptic structures during synaptic plasticity. PMID: 24742464

Statthakis et al. 1997: Human postsynaptic density-95 (PSD95): location of the gene (DLG4) and possible function in nonneural as well as in neural tissues. PMID: 9286702

Vyas and Montgomery 2016: The role of postsynaptic density in neural degeneration and regeneration. PMID: 27482211

Woods and Bryant 1993: ZO-1, DlgA and PSD-95/SAP90: homologous proteins in tight, septate and synaptic cell junctions. PMID: 8155583

Ziff 1997: Enlightening the postsynaptic density. PMID: 9427241

Synaptic Systems（SySy）品牌成立于德國，專注于研發和生產針對突觸和神經科學相關抗體，以及用于細胞生物學、組織病理學和高分辨率顯微鏡的各種抗體，除此之外，還推出與SySy抗體配套使用的試劑盒、試劑等產品組合，全方面滿足客戶的各種需求?？贵w產品線主要有：突觸活性區域相關抗體、突觸后蛋白相關抗體、RNA修飾如m6A抗體、突觸粘附蛋白抗體、SNARE相關抗體、Alzheimer's相關抗體、細胞骨架、離子通道相關抗體等。該品牌產品專業且質量好，在國內外備受好評。作為SySy在中國的區域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的SySy產品。