[干冰]20S蛋白酶體，助力多發性骨髓瘤和其他惡性腫瘤研究

蛋白酶體是真核細胞內的一種大型多催化蛋白酶復合體。26S蛋白酶體是一個包含60個亞基的顆粒，由一個20S核心和一個或兩個19S調節顆粒組成。催化核心，即20S蛋白酶體（700 kDa），由兩組七個β亞基和兩組七個α亞基組成。β1、β2和β5亞基分別具有半胱氨酸酶樣、胰蛋白酶樣和胰凝乳蛋白酶樣的肽解活性。在真核細胞中，20S蛋白酶體的組裝需要至少五種組裝分子伴侶的協助。蛋白酶體對細胞蛋白的降解始于多肽鏈上連接泛素鏈。泛素標簽被19S顆粒的“蓋子”識別并結合，隨后泛素鏈被解離，蛋白質展開并隨后轉運至20S蛋白酶體中。

蛋白酶體活性在細胞的主要事件中發揮著關鍵作用，包括蛋白質質量控制、基因轉錄調控、DNA損傷響應、衰老、氧化應激和信號轉導。在過去二十年中，已經鑒定出許多針對特定活性位點的選擇性蛋白酶體抑制劑。最值得注意的是，硼替佐米（Bortezomib）和卡非佐米（Carfilzomib）是經FDA批準用于治療多發性骨髓瘤的蛋白酶體抑制劑藥物。目前，還有幾種新的蛋白酶體抑制劑正在試驗中，用于治療多發性骨髓瘤和其他惡性腫瘤。

這種純化的20S蛋白酶體制劑可用于體外降解肽段底物和展開的蛋白質。蛋白酶體的胰凝乳蛋白酶樣活性可通過使用Suc-LLVY-AMC（產品編號：PS500）輕松測量。被活性酶切割后，它會產生一種具有460 nm發射波長的高熒光產物。

艾美捷[干冰]20S蛋白酶體：

貨號：PS-0020-0050  

物種：人類  

來源：紅細胞  

標簽：無  

分子量：700 kDa  

數量：50 ug  

濃度：1 mg/mL  

配方：20 mM Tris-HCl，pH 7.2，10%甘油，150 mM KCl，1 mM β-巰基乙醇  

儲存：-80°C，避免反復凍融。

[干冰]20S蛋白酶體圖片：

左圖：20S蛋白酶體（45 ?g/ml）的胰凝乳蛋白酶樣活性是通過在20 mM HEPES（pH 7.5）、0.5 mM EDTA、0.05% Triton X的溶液中，使用100 uM Suc-LLVY-AMC進行測量的，實驗中加入了或未加入0.035% SDS。  

右圖：20S蛋白酶體（18 ?g/ml）的胰凝乳蛋白酶樣活性是通過在20 mM HEPES（pH 7.5）、0.5 mM EDTA、0.05% Triton X的溶液中，使用100 uM Suc-LLVY-AMC進行測量的，實驗中加入了或未加入0.5 mM MG132（產品編號：SI9710）。

文獻參考：

1. Kim HM, et al. (2011) Structure characterization of the 26S proteasome. Biochimica Biophysica Acta 1809(2),67 – 79.

2. Golgberg AL (2012) JCB Development of proteasome inhibitors as research tools and cancer drugs. 199(4),583-588.

3. Stadtmueller BM and Hill CP (2011) Proteasome activators. Mol Cell 41(1):8-19.

4. Lasker K et al. (2012) Molecular architecture of the 26S proteasome holocomplex determined by an integrative approach. PNAS 109(5):1380-1387

5. Kisselev AF, et al. (2012) Proteasome inhibitors: an expanding army attacking a unique target. Chemistry &Biology, 19(1):99-115.

6. Kim Y-C and DeMartino GN (2011) C termini of proteasomal ATPases play nonequivalent roles in cellular assembly of mammalian 26 S proteasome. JBC 286(30): 26652–26666.