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ProFoldin-96孔蛋白折疊板操作步驟說明

發布者:艾美捷科技    發布時間:2025-01-17     
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ProFoldin 96孔蛋白質折疊板為蛋白質折疊篩選提供了96種多樣化的條件。這96種折疊條件包括不同的pH值、鹽濃度和添加劑。每次實驗使用母板中的100微升溶液。每個母板的每個孔中都含有500微升溶液,可用于多次折疊各種蛋白質的實驗。每種條件下使用約20微克的鹽酸胍溶解的包涵體蛋白。一旦確定了折疊條件,就可以為特定條件(孔位)提供制備規模折疊的制備折疊溶液。


ProFoldin 96孔蛋白質折疊板

艾美捷ProFoldin-96孔蛋白折疊板:

代碼:PFS096

組成:一個含有96種蛋白質折疊溶液的96孔板,母板的每個孔中都有500微升溶液;1.4毫升包涵體溶解劑;4毫升中和劑和一個透明的96孔板。

 

蛋白質折疊操作步驟:

樣品準備:請參閱包涵體制備的協議。蛋白質濃度約為10毫克/毫升。

板準備:將板以1000xg的速度離心1分鐘,使所有溶液都收集到孔底。輕輕取下板蓋,將100微升溶液轉移到透明板中。在4℃下預孵育板,并在整個蛋白質折疊過程中將試劑保持在4℃。

稀釋:將上述2微升蛋白質溶液稀釋到每個孔中的溶液中。然后在4℃下孵育板4小時。

中和:將8微升中和劑與每個孔中的溶液混合。在4℃下孵育板過夜。

折疊產物分析

溶解度 :未折疊的蛋白質會形成肉眼可見的沉淀,可通過在405納米(OD405)處的光散射測量來檢測。溶解的蛋白質可以通過SDS - PAGE進行分析。為此,將板以1000xg的速度離心10分鐘,然后將每個孔中的10微升上清液與10微升水和7微升4xSDS - PAGE上樣緩沖液混合。

活性測試 :使用活性測定(催化或結合活性)來檢查蛋白質活性。在測定中將折疊產物稀釋10到20倍。例如,如果測定反應體積為100微升,則在每次反應中加入5到10微升的折疊產物。

對于功能未知或無可用測定的蛋白質 :折疊良好的蛋白質可以通過離子交換、親和或凝膠排阻色譜柱在天然緩沖液中進行純化。CD或SEC - MALS分析僅適用于純化的蛋白質樣品。

 

ProFoldin-96孔蛋白折疊板相關產品:

旋轉柱蛋白質折疊篩選試劑盒 SFC01 - 10

稀釋膜蛋白折疊篩選試劑盒 MPS10 - 20

旋轉柱膜蛋白折疊篩選試劑盒 MFC01 - 20

膜蛋白提取試劑盒 MPE01 - 12S

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ProFoldin專注于蛋白質科學領域的研究與開發。ProFoldin提供一系列與蛋白研究相關的產品和服務,包括蛋白除鹽、蛋白折疊、膜蛋白提取、聚合酶、高通量檢測試劑和熒光染料等。其中蛋白折疊柱和試劑、膜蛋白提取試劑盒為特色產品,成為了廣大科研工作者研究蛋白尤其是膜蛋白有力的科研工具。

 

艾美捷科技是ProFoldin的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。


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