Alpha Diagnostic International（ADI）人抗 PEG IgG ELISA 試劑盒檢測原理

人抗聚乙二醇IgG ELISA試劑盒是一種適用于檢測和定量血清中PEG特異性抗體活性，或等離子體。僅供研究使用（RUO），不用于診斷，治愈或預防疾病。

作為Alpha Diagnostic International（ADI）在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦Alpha Diagnostic International（ADI）熱銷產品人抗 PEG IgG ELISA 試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

人抗 PEG IgG ELISA 試劑盒檢測原理：

抗PEG ELISA試劑盒基于綁定樣本中的抗體PEG抗原固定在微孔。綁定抗體由抗種抗體HRP偶聯物。a之后洗滌步驟，加入顯色底物（TMB），顏色為由HRP底物直接開發與存在的抗PEG抗體的量成比例在樣品中。添加停止解決方案以終止然后使用

450nm處的ELISA讀數器。抗體的存在樣品相對于抗PEG校準器進行測定。

檢測設計和設置

樣本收集和處理

可以使用經過適當稀釋的血清和其他生物液體作為樣本，以避免溶液基質干擾。對于血清，通過靜脈采血，讓血液凝固，并通過室溫離心分離血清。如果樣本不會立即檢測，可以冷藏保存幾周，或冷凍長期保存。

在繼續之前，請先回顧結果解釋（第5-7頁）：

? 選擇適當的樣本稀釋，考慮到預期的陽性效力和最小化非特異性結合（NSB）和其他基質效應；例如，非免疫樣本的凈信號應低于1 U/ml校準品。這通常是人血清中IgG和IgM正常水平的1:100或更高稀釋。

? 運行一個樣品稀釋液空白。這個信號是檢測性能的指標，特別是洗滌效率，并且用于凈OD計算，如果需要的話?？瞻譕D應小于0.3。

? 運行抗PEG陽性對照；值范圍在瓶標簽上。

? 運行一組校準品，驗證檢測是否按照規格執行：10 U/ml應給出高信號（>1.5 OD）；1 U/ml應給出低信號，可用于區分陽性/陰性閾值（見結果解釋，第5頁）。

板設置

將所有試劑預熱至室溫（18-30°C）平衡（至少30分鐘）。

? 確定檢測運行的孔數。推薦包括8個校準孔和每個待檢測樣本對照的2個孔進行復制。

? 從袋中取出適當數量的微孔條，并把未使用的條放回袋中。重新密封袋并冷藏保存。

? 向每個孔中加入200-300ul工作洗滌液，并讓其靜置約5分鐘。在加入樣本前，抽吸或傾倒液體并在紙巾上拍干。

結果解釋

示例：

人血清/血漿IgG

一組未知歷史的人體血清被測試是否含有抗PEG IgG（1:100稀釋）。使用1 U/ml校準品計算閾值指數。

結果

抗PEG IgG：三個樣本（E、H、J）在1:100稀釋時為陽性（高于1.0閾值）；兩個樣本（B、M）為邊緣值；其余樣本為陰性。

當與PEG預吸收時，陽性樣本轉為陰性。

注釋：

1. 陽性可能是由于之前接觸過PEG，或者是先天免疫庫的一部分。

2. 當陽性指數高于5.0時，使用稀釋曲線計算滴度是更準確的定量方法（見方法C）。

3. 可以通過改變樣本稀釋來調整檢測的靈敏度：a) 增加稀釋（例如，1:200）以將邊緣陽性的信號降低到陰性；b) 減少稀釋（例如，1:50）將邊緣樣本轉為陽性。對于后者，陰性的值可能會增加，因此應考慮使用已知陰性樣本開發陽性指數或使用內部對照。

Alpha Diagnostic International（ADI）公司于1993年成立， 是一家美國私營生物技術公司，總部位于德克薩斯州圣安東尼奧，具有USDA認證的動物試驗設施。公司致力于開發、制造和供應新型診斷和質量控制試劑及檢測試劑盒，用于人類和動物的基礎生物學和疾病研究。同時，還提供多肽合成定制服務和多抗產品以及其他抗體相關服務，例如純化親和素，酶耦聯物，染料，熒光染料等。ADI旨在準確了解科學研究人員和診斷測試界的需求，并迅速提供有效的解決方案，成為科學界值得信賴的創新試劑和解決方案提供商。

艾美捷科技是Alpha Diagnostic International（ADI）的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。