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特色產品8-硝基鳥嘌呤(8-NG)是一種由活性氮種類(RNS)引起的突變性DNA/RNA損傷。作為一種修飾的核苷酸堿基,8-NG因其含量豐富以及在DNA復制時通過G到T的轉換突變所表現出的突變潛力而被認為很重要。8-NG還通過引起DNA斷裂形成單鏈DNA參與基因激活/抑制的表觀遺傳調控。此外,研究表明,8-NG濃度的增加與多種炎癥相關疾?。òò┌Y)在病理上有聯系。比較尿液/血清中的8-NG檢測主要反映了全身亞硝化損傷與修復速率之間的平衡。然而,直接定量正常/疾病狀態下不同細胞/組織中的8-NG含量可以識別DNA/RNA的組織特異性亞硝化損傷。因此,這種方法提供了更有用的信息,以更好地理解亞硝化損傷與疾病之間的關系,從而有助于疾病的診斷和治療。
EpiQuik?亞硝化(8-硝基鳥嘌呤)DNA/RNA損傷定量檢測試劑盒(比色法)是一套完整的優化緩沖液和試劑套裝,用于直接比色檢測和定量從任何物種(如哺乳動物、植物、真菌、細菌和病毒)分離的DNA/RNA的亞硝化DNA/RNA損傷(8-硝基鳥嘌呤,8-NG)狀態,形式包括但不限于培養細胞、新鮮和冷凍組織、石蠟包埋組織和體液樣本。
艾美捷Epigentek-EpiQuik亞硝化(8-硝基鳥嘌呤)DNA/RNA損傷定量試劑盒(比色法)(#P-6009-48)具有以下優勢:
比色法檢測,操作步驟簡單方便,快速高效。整個過程可在3小時內完成。
高靈敏度,檢測下限低至2皮克的8-NG。
高特異性,在樣本DNA的指示濃度范圍內僅檢測8-NG,不與其他物質如8-OhG、8-OHdG、dG、鳥嘌呤發生交叉反應。
直接檢測完整的DNA或RNA中的8-NG,消除了高分子化合物(如碳水化合物和蛋白質)的干擾,這些干擾在競爭性8-NG檢測中經常出現。
檢測水平與高效液相色譜(HPLC)或液相色譜-質譜聯用(LC-MS)分析高度相關且接近。
高度便捷的檢測方法,直接使用從細胞或組織中分離的DNA或RNA,無需DNA/RNA消化或水解。
包含適用于任何物種的通用陽性和陰性對照,用于定量8-NG。
條帶式微孔板格式,適用于手動或高通量分析,使檢測更加靈活。
檢測條件簡單、可靠且一致。
原理與操作:
該試劑盒包含用于定量氧化RNA損傷(8-OhG)所需的所有試劑。在該檢測中,RNA被結合到經過特殊處理以具有高RNA親和力的條帶孔中。通過捕獲和檢測抗體檢測8-OhG。檢測到的信號被增強,然后通過在微孔板分光光度計中讀取吸光度進行比色定量。8-OhG的量與測量的吸光度強度成正比。

左圖:EpiQuik? 8-OhG RNA損傷定量檢測試劑盒(比色法)示意圖
右圖:將不同濃度的8-OhG標準對照品加入檢測孔中,然后使用EpiQuik? 8-OhG RNA損傷定量檢測試劑盒(比色法)進行測量。
起始材料與輸入量:
所需的輸入材料是RNA,可以從各種組織或細胞樣本中分離,例如培養瓶或微孔板中的細胞、新鮮和冷凍組織、石蠟包埋組織、血液、體液樣本等。每次檢測所需的RNA量為100納克至300納克。為了最佳定量,輸入RNA量應為300納克,因為基礎8-OhG通常少于總RNA的0.01%。

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