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特色產品Epigenase? APOBEC3A活性/抑制檢測試劑盒是一種完整的優化緩沖液和試劑套裝,用于測量人類及其他哺乳動物細胞提取物或純化的APOBEC3A酶的活性/抑制。該試劑盒可用于多種形式的樣本,包括但不限于培養細胞、新鮮和冷凍組織。
艾美捷Epigentek-表觀基因酶APOBEC 3A活性/抑制測定試劑盒(#P-3142-48)具有以下優勢:
比色法檢測,操作步驟簡單,可在5小時內完成。
創新的試劑盒組成使得背景信號極低,使得檢測過程簡單、準確、可靠且一致。
可使用細胞/組織提取物以及純化的APOBEC3A酶來檢測體內和體外的APOBEC3A抑制劑效果。
新穎的檢測原理實現了高靈敏度,純化APOBEC3A酶的檢測下限低至10納克。
試劑盒包含檢測標準品,用于定量APOBEC3A的特異性活性。
采用條帶式微孔板格式,適用于手動或高通量分析。
原理與操作:
該試劑盒專為檢測APOBEC3A活性/抑制而設計。在使用該試劑盒的檢測中,獨特的5mC(5-甲基胞嘧啶)底物被穩定地包被在條帶孔中?;钚缘腁POBEC3A能夠結合并催化底物中的5mC轉化為T(胸腺嘧啶)。未轉化的5mC可以通過高親和力的5mC抗體識別,并通過增強液增強免疫信號。未轉化的5mC的比例或量與酶活性成反比,可通過類似ELISA的比色反應進行定量。

左圖:使用Epigenase? APOBEC3A活性/抑制檢測試劑盒檢測重組APOBEC3A的活性。不同濃度的重組人APOBEC3A酶被加入檢測體系中。吸光度(OD)與APOBEC3A酶活性成反比。右圖:將圖4中顯示的原始OD數據轉換后的結果。
起始材料 :
輸入材料可以是細胞提取物或純化的APOBEC3A酶。每次檢測所需的細胞提取物量為2微克至30微克,最佳范圍為15-20微克。純化酶的用量為10納克至1微克,最佳范圍為50納克至200納克,具體取決于酶的類型、純度和催化活性。
運輸與儲存:
該試劑盒分兩部分運輸:第一部分在常溫下運輸,第二部分在4℃下使用冷凍冰袋運輸。收到試劑盒后:(1)將A3AS、AAS、DA和ES置于-20℃避光保存;(2)將WB、A3AB、CA、DS和8孔檢測條置于4℃避光保存;(3)將剩余組分(BS和SS)在室溫下避光保存。
注意:使用前檢查10倍洗滌緩沖液(WB)是否含有鹽沉淀。如有沉淀,可在室溫或37℃下加熱并搖晃緩沖液,直至鹽重新溶解。
如果儲存得當,試劑盒的所有組分自發貨之日起有效期為6個月。

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