NanoTag-抗Halo標簽蛋白單域抗體-Halo標簽融合蛋白的高特異性檢測

抗Halo標簽單域抗體 (sdAb anti-Halo) 是一種內部研發的單域抗體（sdAb），可特異性結合HaloTag。它能夠實現Halo標簽融合蛋白的高特異性檢測，并且通常與Halo配體同時結合兼容。

HaloTag(1)技術是分子和細胞生物學中廣泛使用且高度通用的平臺，可用于詳細分析蛋白質功能、動力學和分子相互作用。該技術基于一種經基因工程改造的細菌鹵代烷脫鹵酶，其被修飾后可與合成的Halo配體形成特異且穩定的共價鍵。這些配體可被多種功能基團修飾，包括熒光團、生物素和親和標簽，從而在活細胞成像、蛋白質純化和生化分析中實現多樣化應用。

與傳統的Halo配體不同，抗Halo單域抗體（克隆1A12）識別HaloTag表面暴露的表位，并且通常與Halo配體同時結合兼容，因此在多重應用中保持HaloTag系統的功能完整性。

艾美捷抗Halo標簽蛋白單域抗體：

貨號：N5005-Biotin

克隆號：1A12

宿主：羊駝

生產系統：大腸桿菌

應用：ELISA、免疫熒光（IF）

抗原：HaloTag

靶點：HaloTag

特異性：特異性識別HaloTag，未發現與其他蛋白質的交叉反應。

制劑：DBCO和生物素偶聯的sdAb（C端1:1標記）從PBS pH 7.4中凍干。未偶聯的sdAb從10 mM KPi、150 mM NaCl、1 mM EDTA pH 6.0中凍干。使用250 uL純水復溶后立即使用，或用250 uL 50%甘油復溶后于-80°C儲存。

分子量：14.9 kDa

消光系數：20128

運輸條件：常溫

存儲條件：含凍干試劑的西林瓶可在2-8°C下保存12個月。復溶后，可在-80°C下保存6個月。工作 aliquots 可在-20°C下保存4周。

注意：僅限體外/研究使用。無毒、無危害性、無傳染性。

通過生物層干涉技術（BLI）使用鏈霉親和素生物傳感器，對固定化的抗Halo單域抗體克隆1A12（生物素化，5μg/mL）與Halo標簽分析物（20-0.3125 nM）之間的相互作用進行動力學分析。結合和解離階段（彩色軌跡）采用1:1結合模型進行全局擬合（黑線）。所得動力學參數顯示其具有高親和力結合特性：結合速率常數kon=(2.96±0.17)×10? M??s??，解離速率常數koff=(5.21±0.01)×10?? s??，對應的平衡解離常數KD=176.9±0.2 pM。

參考文獻：

Los GV, Encell LP, McDougall MG, et al. HaloTag: a novel protein labeling technology for cell imaging and protein analysis. ACS Chem Biol. 2008;3(6):373-382. doi:10.1021/cb800025k