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特色產品FluoTag-X2抗ALFA是一種熒光標記的單域抗體(sdAb),能夠特異性地檢測小型、合理設計的ALFA標簽。它能夠直接且高度特異性地熒光檢測ALFA標記的目標,無需使用二抗。
FluoTag-X2抗ALFA基于NanoTag內部開發的一種單域抗體(sdAb),能夠特異性識別小型、合理設計的表位標簽ALFA,其解離常數約為26皮摩爾。該系統的完整特性描述可以在2019年發表于《自然·通訊》的一篇開源文章中找到。
無論樣本是活體還是使用4%多聚甲醛、2%戊二醛或甲醇固定的,FluoTag-X2抗ALFA都能以單價高親和力和特異性結合。像所有FluoTag-X2試劑一樣,每個單域抗體(sdAb)上都特異性地結合了兩個熒光團。
由于NanoTag的FluoTags體積小,ALFA標簽也短(15個氨基酸;PSRLEEELRRRLTEP),目標表位與每個熒光團之間的距離小于3納米。感興趣的蛋白質可以在N端、C端或域間使用NanoTag的ALFA標簽進行標記。ALFA標記的目標蛋白也可以使用NanoTag具有生理洗脫能力的ALFA選擇器樹脂系列與復合物或伴侶結合物進行免疫沉淀或原生純化。
因此,這種ALFA標簽以及配套的FluoTags-X2抗ALFA和ALFA選擇器樹脂是完美選擇,適用于想要與生化純化、質譜分析或任何其他高端應用相結合的基于熒光的實驗。
FluoTags可以配備單個熒光團以實現更定量的讀數(FluoTag-Q),每個單域抗體配備兩個熒光團(FluoTag-X2)。
艾美捷FluoTag-X2抗ALFA AbberiorStar635P:
貨號:N1502-AB635P-L
克隆號:1G5
宿主:羊駝
生產來源:大腸桿菌
應用:免疫熒光(IF)、免疫組化(IHC)、西方印跡(WB)
稀釋比例:1:500(相當于最終濃度5納摩爾)
靶標:ALFA標簽
特異性:它識別ALFA標簽(SRLEEELRRRLTE)。
配方:單個sdAb克隆從含有2% BSA(美國來源)的pH 7.4的PBS中凍干。
運輸:常溫
儲存:含有凍干試劑的安瓿可在2-8°C下保存長達12個月。復溶后,可在-80°C下保存長達6個月。工作分裝可在-20°C下保存長達4周。
注意:僅供體外/研究使用。無毒、無害、無傳染性。

使用FluoTag-X2 Sufo Cyanin 3抗ALFA sdAb(編號N1502,稀釋比例1:1000;紅色)對表達ALFA標簽融合蛋白的PFA固定腦切片進行免疫染色。細胞核用DAPI(藍色)可視化。
文獻參考:
1、G?tzke H, Kilisch M, Martínez-Carranza M, Sograte-Idrissi S, Rajavel A, Schlichthaerle T, Engels N, Jungmann R, Stenmark P, Opazo F, Frey S. The ALFA-tag is a highly versatile tool for nanobody-based bioscience applications. Nat Commun. 2019 Sep 27;10(1):4403. doi: 10.1038/s41467-019-12301-7. PMID: 31562305; PMCID: PMC6764986.
2、Reinders NR, van der Spek SJF, Klaassen RV, et al. Amyloid-β-Driven Synaptic Deficits Are Mediated by Synaptic Removal of GluA3-Containing AMPA Receptors. J Neurosci. 2025;45(9):e0393242024. Published 2025 Feb 26. doi:10.1523/JNEUROSCI.0393-24.2024 (N1502-AF647-L; IF; rat hippocampal neurons)
3、Hodel AW, Rudd-Schmidt JA, Noori T, et al. Acidic pH can attenuate immune killing through inactivation of perforin. EMBO Rep. Published online January 9, 2025. doi:10.1038/s44319-024-00365-6 (N1502-AF568-L; IF of ALFA-PRF release in artificial immune synapses)

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