小鼠TNF alpha ELISA試劑盒，可重復且可靠的結果

產品編號：

小鼠 TNF α 酶聯免疫聯盟試劑盒

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96 種檢測

別名：

TNFα， 腫瘤壞死因子α， TNF-α， DIF， TNF-α， TNFA， TNFSF2

檢測方法：

三明治酶聯免疫吸附法

應用：

該免疫檢測試劑盒允許體外定量測定血清血漿和其他生物體液中的小鼠TNF-α濃度。

敏感性：

18.75皮克/毫升

范圍：

31.25-2000pg/ml

存儲：

4°C 6個月

注意：

僅供研究使用

酶聯免疫吸附法微孔板（可拆卸）

8x12 條

4°C 6個月

凍干標準品

2

4°C/ -20°C

樣品/標準稀釋緩沖液

20毫升

4°C

生物素標記抗體（濃縮）

120ul

4°C（避光）

抗體稀釋緩沖液

10毫升

4°C

HRP-鏈霉親和素偶聯物 （SABC）

120ul

4°C（避光）

SABC 稀釋緩沖液

10毫升

4°C

TMB 基板

10毫升

4°C（避光）

停止解決方案

10毫升

4°C

洗滌緩沖液 （25X）

30毫升

4°C

封板機

5

-

血清

如果使用血清分離管，讓樣品在室溫下凝結 30 分鐘。以 10，1x g 離心 000 分鐘。收集血清級分并立即或等分試樣并將樣品儲存在-80°C。 避免多次凍融循環。

如果未使用血清分離管，則讓樣品在 2-8°C 下凝結過夜。 以 10，1x g 離心 000 分鐘。立即取出血清并測定或等分試樣，并將樣品儲存在-80°C。 避免多次凍融循環。

血漿

使用EDTA或肝素作為抗凝劑收集血漿。在收集后 4 分鐘內以 15 × g 在 1000°C 下離心樣品 30 分鐘。收集血漿級分并立即或等分測定并將樣品儲存在-80°C。 避免多次凍融循環。 注意：過度溶血的樣本不適合與本試劑盒一起使用。

尿液和腦脊液

將尿液（中流）收集在無菌容器中，以20-2000rpm離心3000分鐘。取出上清液并立即測定。如果檢測到任何沉淀，請重復離心步驟。類似的方案可用于腦脊液。

細胞培養上清液

通過移液管收集細胞培養基，然后在 4°C 下以 20 rpm 離心 1500 分鐘。收集澄清的上清液并立即測定。

細胞裂解物

在裂解緩沖液中溶解細胞，并在冰上靜置30分鐘。以 14，000 x g 離心管 5 分鐘以去除不溶性物質。將上清液分裝到新管中，并丟棄剩余的全細胞提取物。使用總蛋白質測定法定量總蛋白質濃度。立即測定或等分試樣并儲存在≤-20°C。

組織勻漿

組織勻漿的制備將因組織類型而異。用1X PBS沖洗組織以去除多余的血液并在20ml 1X PBS（包括蛋白酶抑制劑）中勻漿，并在≤-20°C下儲存過夜。 需要兩個凍融循環來破壞細胞膜。為了進一步破壞細胞膜，您可以對樣品進行超聲處理。在5xg下離心勻漿5000分鐘。取出上清液并立即或等分試樣測定，并儲存在-20°C或-80°C。

組織裂解物

用PBS沖洗組織，切成1-2毫米的碎片，并用PBS中的組織均質器勻漿。加入等體積的含有蛋白酶抑制劑的RIPA緩沖液，并在室溫下輕輕攪拌裂解組織30分鐘。離心機清除碎屑。使用總蛋白質測定法定量總蛋白質濃度。立即測定或等分試樣并儲存在≤-20°C

母乳

收集牛奶樣品并在 10°C 下以 000，60 x g 離心 4 分鐘。 等分上清液并測定。長期使用時，請將樣品儲存在-80°C。 盡量減少凍融循環。