Cell Biolabs 唾液酸總量測定試劑盒(比色法)：精準定量分析唾液酸的高效解決方案

至少有43種含有N-或O-取代的衍生物，其中最常見的衍生物是N-乙酰神經氨酸（NANA或Neu5Ac）。雖然在正常人血清中已檢測到毫摩爾濃度的唾液酸，但細胞內含量最高的唾液酸存在于大腦神經節苷脂中，這些神經節苷脂在神經傳遞、記憶存儲以及突觸形成中發揮作用。此外，富含唾液酸的蛋白質（稱為唾液酸糖蛋白）可以結合細胞黏附分子選擇素（Selectin）。在轉移性癌細胞表面積累的唾液酸糖蛋白會導致細胞表面負電荷顯著增加，從而排斥其他細胞，并促進癌細胞進入血液。嚴重的常染色體隱性神經退行性疾病——唾液酸貯積癥（SSDs），是由唾液酸跨溶酶體膜運輸缺陷引起的，導致唾液酸在組織、成纖維細胞和尿液中積累。這種運輸缺陷可以通過定量尿液中游離唾液酸來檢測。此外，某些病毒和細菌利用唾液酸進行宿主結合和識別。例如，所有流感A病毒株都需要唾液酸才能與細胞結合。當流感A病毒結合細胞表面的唾液酸受體時，細胞會內化病毒，從而導致細胞感染。

Cell BioLabs的總唾液酸檢測試劑盒是一種簡單的比色法檢測方法，可在96孔微孔板格式中測量生物樣本中總唾液酸的含量。

每個試劑盒提供足夠的試劑進行多達100次檢測（包括空白、唾液酸標準品和未知樣本）。通過與已知濃度的唾液酸標準品進行比較，確定樣本中的唾液酸濃度。該試劑盒的檢測靈敏度下限為6.25 ?M唾液酸。

注意：每個樣本重復需要2次檢測，一次用唾液酸醛縮酶處理（+SAA），一次不處理（-SAA）。唾液酸的計算基于兩個孔的吸光度（OD）讀數差異。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs熱銷產品唾液酸總量測定試劑盒(比色法)。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

檢測原理

Cell BioLabs的總唾液酸檢測試劑盒用于測量生物樣本中的總唾液酸。唾液酸與蛋白質和其他分子結合后，首先通過神經氨酸酶處理轉化為游離形式。然后在唾液酸醛縮酶存在的情況下，唾液酸被轉化為丙酮酸。最后，在磷酸和氧氣存在的情況下，丙酮酸被丙酮酸氧化酶氧化為乙酰磷酸、二氧化碳和過氧化氫。生成的過氧化氫通過高特異性的比色探針進行檢測。辣根過氧化物酶催化探針與過氧化氫之間的反應，二者以1:1的比例結合。樣本和標準品在96孔微孔板格式中進行比較，孵育30分鐘后，使用標準96孔比色板讀數器讀取結果（見圖1）。

相關產品

1. MET-5125：丙酮酸檢測試劑盒（比色法）  

2. MET-5162：磷酸烯醇式丙酮酸檢測試劑盒（熒光法）  

3. MET-5022：糖原檢測試劑盒（比色法）  

4. MET-5019：總磷酸脂酸檢測試劑盒（熒光法）  

5. MET-5159：焦磷酸鹽檢測試劑盒（熒光法）

試劑盒組成

盒子1（藍色冰袋運輸）  

1. 唾液酸標準品（部件號50151C）：1管50 ?L的N-乙酰神經氨酸，濃度為160 mM。  

2. 比色探針（部件號50222C）：1管50 ?L，溶于DMSO。  

3. 辣根過氧化物酶（HRP）（部件號234402-T）：1管10 ?L，濃度為100 U/mL，溶于甘油。  

4. FAD（部件號50293C）：1管50 ?L，濃度為2 mM的黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）。  

5. TPP（部件號50294C）：1管50 ?L，濃度為2 mM的硫胺素焦磷酸（TPP）。  

6. 神經氨酸酶（部件號51562D）：1管300 ?L。  

7. 唾液酸醛縮酶（部件號51563D）：1管500 ?L。  

8. 丙酮酸氧化酶（部件號50295C）：1管300 ?L。  

盒子2（藍色冰袋運輸）  

1. 10倍檢測緩沖液（部件號50292A）：1瓶25 mL。  

2. 10倍反應緩沖液（部件號51561A）：1管1.4 mL。  

未提供材料

1. 蒸餾水或去離子水  

2. 10 kDa分子量截留（MWCO）離心過濾器（例如Amicon Ultra 0.5 mL）  

3. 磷酸鹽緩沖液（PBS）  

4. 標準96孔透明微孔板和/或透明細胞培養微孔板  

儲存條件

收到試劑盒后，將10倍反應緩沖液和10倍檢測緩沖液儲存在4℃。將神經氨酸酶和唾液酸醛縮酶儲存在-80℃。將其他所有組分儲存在-20℃或-80℃。比色探針對光敏感，必須妥善保存。避免多次凍融循環。

結果示例：

下圖顯示了典型的總唾液酸檢測試劑盒結果。應該使用數據以下僅供參考。這些數據不應用于解釋或計算實際的樣本結果。

文獻參考：

1. Wang B, Miller JB, McNeil Y, and McVeagh P (1998). Comp. Biochem. Physiol. 119A: 435-439.

2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) Neurochem. 79:266.

3. Hangloo VK, Kaul I, and Zargar HR (1990) J. Postgrad. Med. 36: 140-142.

4. Fuster MM and Esko JD. (2005). Nature Reviews Cancer 5: 526–42.

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Webster RG, & Kawaoka Y (1998) J.Virology, 72:7367-7373.

6. Wang B and Miller JB. (2003) Eur. J. Clin. Nutr. 57, 1351–1369.

7. Mandal C and Mandal C (1990) Cell. Mol. Life Sci.46:433-441.

8. Wang B. (2012) Adv Nutr. 3: 465S–472S.

Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業城市圣迭戈（San Diego），是有名的細胞學試劑品牌，作為前沿的細胞學分析檢測試劑盒生產商，為生物技術和研究類客戶提供好的基于細胞功能研究以及疾病等方面的高端產品和技術服務。產品主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領域。全球眾多大學、政府研究機構、生物、制藥企業的科研實驗室均在使用Cell Biolabs的產品。