谷氨酸測定試劑盒，比色法檢測，適用于所有物種

谷氨酸是一種非必需氨基酸，在體內發揮多種重要的代謝作用。作為一種神經遞質，它促進神經細胞之間的通信，有助于大腦功能和認知。谷氨酸也是蛋白質合成中的關鍵分子，有助于其他氨基酸的生成。此外，谷氨酸還是谷胱甘肽的前體，谷胱甘肽是一種強效抗氧化劑，能夠幫助細胞抵御氧化損傷。谷氨酸還參與能量代謝，因為它可以轉化為α-酮戊二酸，這是三羧酸循環中的一個關鍵中間體。AkrivisBio的谷氨酸檢測試劑盒是一種簡單、靈敏的檢測手段，能夠檢測多種組織中的谷氨酸含量，檢測靈敏度可達每孔小于0.2納摩爾。

艾美捷谷氨酸測定試劑盒：

貨號：MA-0133

規格：100孔

樣本類型：細胞裂解液、組織提取液、尿液、血清、血漿、其他生物流體

適用物種：通用（適用于所有物種）

檢測方法：比色法，檢測波長450納米

檢測類型：定量

應用：基于微孔板的比色法檢測，用于測量樣本中谷氨酸的濃度，最低檢測濃度可達每孔0.2納摩爾。

靈敏度：<0.2納摩爾/孔

儲存條件：-20°C

運輸條件：凝膠冷藏包

谷氨酸測定試劑盒組成：

-檢測緩沖液：25毫升，貨號WM MA-0133-A

-谷氨酸脫氫酶：凍干粉，綠色，貨號MA-0133-B

-NAD/四氮雜卓混合液：凍干粉，紅色，貨號MA-0133-C

-谷氨酸標準品：100微升，黃色，貨號MA-0133-D

谷氨酸測定試劑盒檢測原理：

1. 谷氨酸在谷氨酸脫氫酶的作用下被氧化轉化為α-酮戊二酸和氨（NH?），同時NAD被轉化為NADH。

2. NADH用于將四氮雜卓轉化為具有最大吸收波長為450納米的高色素甲臜。

儲存和處理：

將試劑盒儲存于-20°C。使用前將檢測緩沖液恢復至室溫。打開試劑瓶前請短暫離心。

檢測緩沖液：直接使用，儲存于4°C。

谷氨酸脫氫酶：用220微升檢測緩沖液復溶。儲存于-20°C。使用時保持在冰上。如果需要在一段時間內反復使用該試劑，建議將酶分裝成小份量并儲存于-20°C。

NAD/四氮雜卓混合液：用220微升去離子水復溶。

谷氨酸標準品（40 mM）：直接使用。

檢測步驟：

1. 標準曲線制備：將10微升谷氨酸標準品轉移至990微升檢測緩沖液中，配制成0.4 mM的溶液。將0、5、10、15、20、25微升的標準溶液分別轉移至96孔板的多個孔中（每個濃度重復兩次），以生成0、2、4、6、8、10納摩爾/孔的標準系列。用檢測緩沖液將所有孔的體積調整至50微升。

2. 樣本準備：將組織（10毫克）或細胞（1×10?）在100微升檢測緩沖液中勻漿。以16,000×g離心5分鐘，去除顆粒。將上清液轉移至新的試管中。將2-50微升樣本轉移至96孔板中。用檢測緩沖液將所有孔的體積調整至50微升。準備一個平行的樣本孔作為背景對照。建議測試幾個不同濃度的樣本，以確保讀數在標準曲線范圍內。

注意：某些樣本可能會產生較高的背景值。為了應對這種情況，建議將樣本以雙份運行，其中一份用作背景對照。

3. 啟動反應：每個反應需要100微升反應混合液。

4. 測量：在37°C下，使用微孔板讀數器監測450納米處的吸光度，持續30分鐘。

5. 典型結果：

6. 計算：

-從所有標準品讀數中減去0標準品的讀數。繪制背景校正后的標準曲線。確定標準曲線的斜率。該斜率定義了從檢測中獲得的OD/納摩爾值。

-從每個未知樣本對中減去背景對照孔的讀數。將背景校正后的未知樣本值除以標準曲線的斜率，以確定樣本孔中的谷氨酸含量。

-將這些值轉換為原始樣本中的谷氨酸含量：

-A. 孔中谷氨酸的納摩爾數 / 應用于孔中的樣本微升數 = 應用于孔中的樣本中的谷氨酸納摩爾數/微升

-B. 應用于孔中的樣本中的谷氨酸納摩爾數/微升 × 應用于孔中的樣本總體積 = 應用于孔中的樣本中的總谷氨酸納摩爾數

-C. 應用于孔中的樣本中的總谷氨酸納摩爾數 / 毫克組織（或細胞數量等） = 納摩爾數/毫克（細胞數量等）