基于J2的雙鏈RNA ELISA試劑盒—無需額外驗證

J2已被用于闡明抗病毒反應是如何啟動的，病毒采取了哪些反策略來避免它們，并通過對病毒核酸復制位點進行超微結構定位研究來探索病毒生命（Welsch等人，2009&Knoops等人，2011）。J2也被推薦作為診斷工具，以檢測未確定的病原體本質上是細菌還是病毒（Richardson等人，2010）。最近，J2也被用于監測體外合成的mRNA制劑中dsRNA的去除，這些制劑可能在基因治療中具有潛在的用途（Kariko等人，2011）。J2已成功用于各種免疫捕獲方法，例如ELISA中。

艾美捷基于J2的雙鏈RNA ELISA試劑盒 #KBBA56：

校準器范圍：0 納克/毫升 - 200 納克/毫升

敏感性：~1.5 納克/毫升

樣品類型：細胞培養上清液和生物制劑

運輸條件：2 - 8 攝氏度

檢測方法：450 nm 比色法

用法：僅供研究使用

基于J2的雙鏈RNA ELISA試劑盒檢測原理：

KRIBIOLISA 雙鏈 RNA （dsRNA） ELISA 采用定量夾心酶免疫測定技術。它基于使用兩種雙鏈RNA（dsRNA）特異性單克隆抗體，可以靈敏和選擇性地檢測dsRNA分子（>=40 bp），而不受其核苷酸組成和序列的影響。dsRNA （J2） 抗體預包被到微孔上。將樣品和標準品移液到微孔中，并由捕獲抗體結合。然后，將HRP（辣根過氧化物酶）偶聯的抗dsRNA （K1）移液并孵育。洗滌微孔以去除任何非特異性結合后，將即用型底物溶液（TMB）添加到微孔中，顏色與樣品中dsRNA的量成比例發展。然后通過添加終止溶液停止顯色。在450nm處測量吸光度。

基于J2的雙鏈RNA ELISA試劑盒檢測程序：

使用前將所有試劑置于室溫。強烈建議所有控件和示例應重復或一式三份運行。

在各自的孔中加入100ul制備的陽性對照/標準品和樣品。

密封板并在 37*C 下孵育 120 分鐘。

吸出并用洗滌緩沖液（4X）洗滌板1次，并通過在吸收紙上用力倒置板來吸干殘留緩沖液。擦拭微量滴定孔外底部的任何液體，因為任何殘留物都會干擾讀數步驟。

向所有孔中加入100ul的dsRNA特異性K1檢測：HRP偶聯物。

密封板并在 37*C 下孵育 60 分鐘。

重復洗滌步驟（4）。

在每個孔中加入100ul的TMB底物。

將微孔板在室溫下在黑暗中孵育30分鐘。請勿搖晃，否則可能會導致更高的背景和更差的精度。陽性孔應變成藍色。

移出 100 ul 的停止溶液。井的顏色應該從藍色變成黃色。11.用酶標儀讀取450nm處的吸光度。