KA2461-KLH IgM(小鼠)ELISA試劑盒：適用于血漿和血清樣本的高效檢測

KLH IgM(小鼠)ELISA試劑盒：KLH IgM（小鼠）ELISA試劑盒用于定量測量血漿和血清中的KLH IgM。

艾美捷KLH IgM(小鼠)ELISA試劑盒：

貨號：KA2461

校準范圍：6.25至100 ?g/mL

適用樣本：血漿、血清

樣本體積：100 ?L

標記：HRP結合物

檢測方法：比色法

監管狀態：僅供研究使用（RUO）

測定類型：定量

反應性：小鼠

應用：定量

儲存說明：將凍干標準品儲存于-20℃。將所有其他組分儲存于4℃。

僅供研究使用（RUO）

KLH IgM(小鼠)ELISA試劑盒檢測原理：

KLH IgM（小鼠）ELISA試劑盒基于固相酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。該測定使用KLH進行固相（微量滴定孔）固定和辣根過氧化物酶（HRP）偶聯用于檢測抗小鼠IgM抗體。將測試血清或血漿樣本稀釋并在微量滴定孔1小時。隨后洗滌微量滴定孔，加入HRP綴合物孵育45分鐘。因此，抗KLH IgM分子夾在固定的KLH和檢測抗體偶聯物。然后洗滌孔以去除未結合的HRP標記抗體，以及加入TMB試劑，在室溫下孵育20分鐘。這導致了藍色。通過添加終止溶液來停止顯色；將顏色更改為黃色。光學在450nm處用分光光度法測量密度?？筀LH IgM的濃度與測試樣品的光密度。

使用注意事項：

? 僅供研究使用，不用于診斷目的。

? 在使用試劑盒之前，請仔細閱讀并理解說明書。

? 本試劑盒設計用于測量免疫后5天收集的血清中的抗KLH IgM水平。免疫后超過5天收集的血清可能含有高水平的抗KLH IgG，這些IgG會與抗KLH IgM競爭固定化的KLH，從而造成干擾。

? 所有試劑在使用前應放置至室溫（25℃）。

? 應通過實驗確定最佳樣本稀釋度。然而，我們建議初次稀釋樣本500倍。請勿使用小于25倍的稀釋度。

? 如果在每個步驟中，試劑在5分鐘內加入微孔板的孔中，則可獲得最佳結果。

? 操作限制

? 當按照上述詳細說明完整理解并執行測定程序時，將獲得可靠且可重復的結果。

? 洗滌步驟至關重要。洗滌不足會導致精密度差和吸光度讀數虛高。

試劑準備：

? 洗滌液準備

提供的洗滌液為20倍濃縮液。使用前，將瓶中內容物（50 mL）用950 mL蒸餾水或去離子水稀釋。

? 標準品準備

小鼠抗KLH IgM標準品為凍干儲備液。按照瓶簽上的說明復溶儲備液。

標記5個聚丙烯或玻璃管，分別為100、50、25、12.5和6.25 ?g/mL。

按照儲備瓶標簽上的詳細說明，在標記為100 ?g/mL的管中準備100 ?g/mL的標準品。

將稀釋液250 ?L分別加入剩余的管中。

通過將100 ?g/mL標準品250 ?L與標記為50 ?g/mL的管中的250 ?L稀釋液混合稀釋，制備50 ?g/mL的標準品。

同樣通過連續稀釋法制備25、12.5和6.25 ?g/mL的標準品。

樣本準備：

一般說明：抗KLH IgM存在于KLH免疫小鼠的血清中，濃度約為10,000 ?g/mL。為了獲得在標準曲線范圍內的數值，我們建議樣本初次稀釋500倍，使用以下程序對每個待測樣本進行操作：

分別向不同的管中加入48 ?L和237.5 ?L稀釋液。

將2 ?L血清/血漿樣本加入含有48 ?L稀釋液的管中，混勻。這提供了25倍稀釋的樣本。

將12.5 ?L 25倍稀釋的樣本與第二管中的237.5 ?L稀釋液混合。這提供了樣本的500倍稀釋。

對每個待測樣本重復此程序。

典型標準曲線：

下圖展示了以450 nm處的吸光度讀數為Y軸，抗KLH IgM濃度為X軸的典型標準曲線。該曲線僅用于說明目的，不應用于計算未知數。

KLH IgM(小鼠)ELISA試劑盒文獻參考：

1. Low-dose influenza vaccine Grippol Quadrivalent with adjuvant Polyoxidonium induces a T helper-2 mediated humoral immune response and increases NK cell activity. Vladimir Talayev, Irina Zaichenko, Maria Svetlova, Alexei Matveichev, Olga Babaykina, Elena Voronina, Andrei Mironov. Vaccine. 2020 Sep 29;38(42):6645-6655. doi:10.1016/j.vaccine.2020.07.053.

2. Pancreatic lipase-related protein 2 is responsible for the increased hepatic retinyl ester hydrolase activity in vitamin A-deficient mice. Gao Y, Lu W, Sun Q, Yang X,Liu J, Ge W, Yang Y, Zhao Y, Xu X, Zhang J. FEBS J.2019 Jun 14. [Epub ahead of print]