Abnova Cxcl10（大鼠）ELISA試劑盒檢測原理&結果計算

大鼠IP-10，即10 kDa干擾素-γ誘導蛋白，也稱為C-X-C基序趨化因子10，是一種由位于14號染色體14p22位點的Cxcl10基因編碼的98個氨基酸的細胞因子蛋白。在初始合成后，21個氨基酸的信號序列從N端區域被移除，使得77個氨基酸的IP-10蛋白能夠正確折疊并成熟。IP-10是一種促炎細胞因子，能夠誘導血管平滑肌細胞中的DNA合成、細胞增殖和細胞遷移。除了作為促炎細胞因子的作用外，IP-10可能還通過癌基因Ras和血清生長因子的誘導參與T細胞效應功能，甚至可能參與T細胞的發育；癌基因誘導是持續性的，而血清誘導則是短暫的。  

作為Abnova全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Abnova熱銷產品Cxcl10（大鼠）ELISA試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Cxcl10（大鼠）ELISA試劑盒檢測原理：

Cxcl10（大鼠）ELISA試劑盒包含用于定量檢測自然或重組大鼠IP-10濃度的必要組分，適用于包括上清液、血清和血漿在內的任何實驗樣本。這種特定的免疫分析采用“夾心”酶聯免疫吸附測定（ELISA）的定量技術，其中目標蛋白（抗原）以“夾心”形式被預先包被在每個孔底的初級捕獲抗體和隨后由研究者添加的次級檢測抗體所結合。

每個孔底包被的捕獲抗體針對大鼠IP-10上的特定表位，而用戶添加的檢測抗體則結合到被捕獲目標蛋白上的表位。在操作的每一步驟中，都需要進行一系列洗滌步驟，以確保消除蛋白質之間或蛋白質與固相之間的非特異性結合。

在目標抗原孵育和“夾心”形成后，辣根過氧化物酶通過與次級抗體的恒定重鏈結合（無論是通過共價鍵還是通過生物素-鏈霉親和素相互作用），在加入底物后可以引發比色反應。當加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基聯苯胺）時，由過氧化物酶催化的反應產生藍色，代表抗原濃度。

在顏色充分發展后，可以通過加入終止液（2 N硫酸）來終止反應，溶液顏色將變為黃色。然后可以通過分光光度計讀取每個孔的吸光度，從而生成標準曲線并隨后確定蛋白濃度。

標準曲線：

注意：標準曲線僅用于說明目的，不應用于計算未知樣本濃度。每次進行實驗時都應生成新的標準曲線。

結果計算：

計算每個標準品、對照品和樣本的重復或三重復讀數的平均值，并減去零標準的平均吸光度值。使用Microsoft Excel或其他能夠建立四參數邏輯（4-PL）曲線擬合的計算機軟件生成標準曲線。如果使用Excel或其他繪圖工具，將平均吸光度值（以吸光度單位表示，y軸）與已知標準品濃度（以pg/ml表示，x軸）進行繪制。僅使用能夠建立明顯梯度的值。之后，通過回歸分析在繪制的點之間生成最佳擬合曲線或“趨勢線”。

Abnova生產的所有產品，包括重組蛋白和抗體均采用目前國際上最先進的生產和SPF級動物設施。Abnova引進CFS先進的麥胚無細胞蛋白合成系統及獨有的全自動蛋白純化技術，向全球蛋白質學客戶提供最高品質的重組蛋白產品。Abnova通過與歐洲的分子生物學實驗室（EMBL，Eurpean Molecular Biology Laboratory）共同開發的單克隆抗體生產系統，包括高通量的抗原準備、多位點免疫、自動融合與篩選分析。其中MaxPab技術是Abnova專利的能雙重識別平面線性蛋白及三維空間結構上接近的蛋白的抗體技術，非常適合用于免疫學檢測，MaxPab抗體以真核表達的全長蛋白作為免疫原，制備純化而來，具有非常高的免疫識別功能，同時后繼的純化技術也保證了極高的特異性，非常適合免疫學檢測。