Jena Bioscience/艾美捷CuAAC細胞反應緩沖液套件的組成及應用探究

銅 ( Cu (I)) 催化的疊氮化物-炔烴 C 反應 ( CuAAC )描述了疊氮化物官能化分子 A 與末端炔烴官能化分子 B 的反應，通過該反應產生穩定的綴合物 AB三唑部分。

由于末端炔烴對疊氮化物相當不活潑，因此 CuAAC 反應的效率很大程度上取決于金屬催化劑的存在，例如 +1 氧化態的銅離子 (Cu(I))。

可以使用不同的銅源、還原劑和 Cu(I) 穩定配體，但是，對于大多數生物共軛應用，可將 Cu(II) 鹽 CuSO 4作為銅源、水溶性 Cu(I) 穩定配體（例如 BTTAA）和推薦使用抗壞血酸鈉作為還原劑。[1-3]

使用Picolyl-Azide試劑代替傳統的Azide試劑可以進一步提高反應效率，并由于內部銅螯合部分而降低所需的最終CuSO 4濃度。[4]

CuAAC 細胞反應緩沖液試劑盒（基于 BTTAA）適用于對含有代謝功能化炔烴或疊氮化物修飾生物分子的細胞進行銅 (Cu(I)) 催化疊氮化物-炔點擊化學反應 (CuAAC)。

Jena Bioscience試劑盒提供足夠的量以進行50 次 CuAAC 實驗 à 500 ?l，使用 2 mM CuSO 4（銅源）、10 mM BTTAA（Cu(I) 穩定配體）和 100 mM 抗壞血酸鈉（還原劑）在 100 mM Na-溶液中進行。磷酸鹽反應緩沖液。

艾美捷Jena Bioscience CuAAC細胞反應緩沖液套件（基于BTTAA）#CLK-073參數：

適合一般實驗室使用。

運輸：在環境溫度下運輸

儲存條件：儲存在 4 °C 下

可以短期暴露于環境溫度（累計最多 1 周）。

保質期：交貨后12個月

Jena Bioscience-CuAAC細胞反應緩沖液套件含量：

銅源：

2 x 10 mg CuSO 4 (M = 159.6 g/mol)，#CLK-MI004)

Cu(I) 穩定配體：

5 x 25 mg BTTAA（M= 430.5 g/mol，#CLK-067）

還原試劑：

4 x 200 mg 抗壞血酸鈉（M = 198.1 g/mol，#CLK-MI005）

反應緩沖液：

2 x 30 ml 無菌 100 mM 磷酸鈉緩沖液，pH 7

10 ml 無菌 ddH 2 O

需要但未提供的材料：

炔或疊氮化物功能化的底物，例如含有代謝功能化的炔或疊氮化物修飾的生物分子的固定和透化細胞。

(吡啶基)-疊氮化物或炔烴檢測試劑和適當的溶劑（例如DMSO）

用于標記固定和透化的細胞：

洗滌溶液，例如含有 3% BSA 的 PBS

固定溶液，例如含有 3.7% 甲醛的 PBS

透化溶液，例如含有 0.5% Triton X-100 的 PBS

用于成像的封固劑

其他標記試劑，例如核染色劑或抗體

Jena Bioscience-CuAAC細胞反應緩沖液套件文獻參考：

[1] Presolski et al. (2011) Copper-Catalyzed Azide-Alkyne Click Chemistry for Bioconjugation. Current Protocols in Chemical Biology 3:153.

[2] Hong et al. (2011) Analysis and Optimization of Copper-Catalyzed Azide-Alkyne Cycloaddition for Bioconjugation. Angew. Chem. Int. Ed. 48:9879.

[3] Besanceney-Webler et al. (2011) Increasing the Efficiacy of Bioorthogonal Click Reactions for Bioconjugation: A Comparative Study. Angew. Chem. Int. Ed. 50:8051.

[4] Uttamapinant et al. (2012) Fast, Cell-Compatible Click Chemistry with Copper-Chelating Azides for Biomolecular Labeling. Angew. Chem. Int. Ed. 51:5852.

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