基質膠凝膠制備方法及相關FAQ

類器官（organoids）是指一種利用干細胞、祖細胞等在體外培養出的3D細胞培養物并具有一定的空間結構組織類似物。2021年，類器官技術被列為“十四五”國家重點研發專項，作為疾病模型，相比于傳統2D疾病模型，類器官在闡明疾病的發展、穩態性和發病機理等與體內環境更加接近，在多領域將發揮重要，諸如細胞治療、藥物研發、基因工程、免疫研究、組織再生等領域?；|膠作為類器官和3D培養的重要載體，在其中發揮著舉足輕重的作用。

基質膠是從富含胞外基質蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長因子。在室溫條件下，基質膠聚合形成具有生物學活性的三維基質，能模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養和分化。

凝膠制備方法

1）基質膠融化后，用預冷的槍頭混勻基質膠。

2）將需要使用的培養板置于冰上，然后將培養的細胞與基質膠混合，用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150-200 μL/cm2生長面積的濃度加入基質膠制備3D培養使用的凝膠，詳見下圖。

3）在37℃放置30min，此時即可加入細胞培養液。

3D細胞及類器官培養過程：

艾美捷Biogradetech 低生長因子，基質膠（類器官，3D培養）詳情：

中文名稱：低生長因子，基質膠（類器官，3D培養）

英文名字：Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced (For Organoid/3D cell culturing)

貨號：A-MGL01-10mL

規格：10mL

形式：標準型基質膠4℃溶解后，呈透明流動液態狀態；高濃度基質膠0℃溶解后，呈透明流動液態狀態，4℃久置呈半凝膠狀

保存建議：≤-20°C

基質膠FAQ：

1、拿到的基質有色差的變化（淡黃色到深紅色）是什么原因？

對于含酚紅的基質膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的，但是與5％CO2平衡后色差即會減少。凍融后，輕輕搖晃試劑瓶使基質膠分散均勻。

2、基質膠的操作要注意哪些事項？

所有操作需在無菌環境下進行，應使用預冷的器材以保證基質膠正常操作。

3、基質膠的如何分裝凍存使用？

可將凍融后的基質膠分裝在多個凍存管，凍存管需預冷，分裝后迅速冷凍并保存，避免多次凍融。

Biogradetech研究領域：蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。