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GeneCopoeia轉染試劑,攻堅克難:快、準、狠

發布者:艾美捷科技    發布時間:2019-11-26     
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細胞轉染是指將外源基因如DNA,RNA等導入細胞內的一種技術。根據哺乳動物細胞蛋白表達流程,細胞培養完成后需進行細胞轉染,根據不同的實驗目的可選擇不同的轉染方法。目前,常用的細胞轉染方法主要分為三類途徑:物理介導(電穿孔法,基因槍法、顯微注射法)、化學介導(脂質體轉染法、磷酸鈣共沉淀法、陽離子聚合物介導法)、生物介導(病毒介導轉染、原生質體轉染)。

 


 

脂質體轉染原理圖

 

細胞轉染方法

細胞轉染原理

主要特點

適用類型

陽離子脂質體轉染法

帶正電荷的脂質體靠靜電作用和DNA 結合形成 DNA-脂質體復合物,然后通過細胞的內吞作用進入細胞

·操作簡便
·適用于各種裸露的DNA和RNA片段
·適合轉染各種細胞
·對DNA濃度有一定要求
·重復性好,但轉染時需除血清

瞬時轉染
穩定轉染
所有細胞

DEAE-右旋糖苷法

帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸的磷酸基團形成帶正電的復合物,復合物和帶負電的細胞膜接觸后而被細胞膜攝取

·有一定的毒性
·操作簡單,適用性廣
·重復性好,但轉染時需除血清

瞬時轉染

磷酸鈣法

磷酸鈣能夠促進外源DNA和細胞的結合,磷酸鈣-DNA復合物能夠附著到細胞表面,并通過內吞作用進入細胞

·操作簡單
·對DNA濃度要求高
·適用性有局限(不適用于原代細胞)

瞬時轉染
穩定轉染

電穿孔法

高脈沖的電壓破壞細胞膜,在細胞膜表面形成孔道,DNA通過孔道進入細胞

·適用性廣,適用于質粒和幾十kb的基因組片段
·針對不同細胞要優化實驗條件細胞
·致死率較高

瞬時轉染
穩定轉染
所有細胞

顯微注射法

利用顯微操作系統和顯微注射技術將
DNA直接注入到細胞中

·整合率較高,適用于工程改造和轉基因動物的建立
·操作復雜,且需要昂貴精密的設備
·外源基因的整合位點和拷貝數無法控制,會導致片段缺失、突變

瞬時轉染
穩定轉染

逆轉錄病毒轉染

通過病毒的膜蛋白和細胞表面的受體相互作用而進入細胞,利用宿主細胞酶自行轉錄復制合成DNA,并隨機整合到細胞基因組中

·轉染效率高,適用于難轉染細胞轉染利用病毒介導轉染,外源基因整合較穩定
·逆轉錄病毒只選擇感染分裂細胞
&middot;容納外源基因長度<8kb

瞬時轉染
穩定轉染
特定細胞

 

隨著分子生物學的發展,轉染已經成為研究和控制細胞基因功能、實現基因調控的常規工具。理想的基因轉染試劑應該具有如下特點:高效轉染;安全;低細胞毒性;方法簡單;省時、經濟。

 

作為NCBI推薦的基因克隆供應商,GeneCopoeia推出5款不同類型的轉染試劑:

 

※ EndoFectin&trade; Max(基于脂質體轉染原理的轉染試劑)

 

產品特性

  1. 對比Lipofectamine&reg; 2000,EndoFectin&trade; Max在多種哺乳動物細胞中具有更優良的轉染效率,適用于多種細胞系的轉染操作;

  2. 對比Lipofectamine&reg; 3000,EndoFectin&trade; Max具有同等或更高的轉染效率;

  3. 對比Lipofectamine&reg; 2000,EndoFectin&trade; Max對siRNA和質粒均有更優良的轉染效率;

  4. 細胞毒性低;

  5. 進行轉染操作時,不需提前去除細胞培養液或血清;

  6. 進行轉染操作后,不需清洗細胞或更換培養基;

  7. 適用于基因過表達、基因敲減、敲除的常規轉染操作,亦適用于微孔板的高通量轉染操作。

貨號

名稱

適用性

EF003

EndoFectin&trade; Max轉染試劑 (1 mL)

廣泛適用于多種細胞

EF004

EndoFectin&trade; Max轉染試劑 (3 mL)

 

※ CRISPR-Fectin&trade;(CRISPR-Cas9核蛋白專用的轉染試劑)

 

產品特性

  1. 專門用于Cas9蛋白和合成的sgRNA的轉染實驗;

  2. 與其它公司的同類型產品相比,具有更高的轉染效率;

  3. 轉染前無需提前去除細胞培養液或血清;

  4. 轉染后無需更換培養基。

貨號

名稱

適用性

EF015

CRISPR-Fectin&trade; 轉染試劑 (1 mL)

優化的CRISPR-Cas9核蛋白專用的轉染試劑??膳cGeneHero&trade; Cas9蛋白配合使用

EF016

CRISPR-Fectin&trade; 轉染試劑 (3 mL)

 

※ EndoFectin&trade; Expi293(為Expi293F懸浮細胞進行優化設計)

 

產品特性

  1. 特別為Expi293F懸浮細胞進行優化設計,配合Expi293F懸浮細胞使用,可提高實驗效率;

  2. 與其它公司的同類型產品相比,在Expi293F懸浮細胞的轉染效率更高;

  3. 進行轉染操作時,不需提前去除細胞培養液或血清;

  4. 進行轉染操作后,不需清洗細胞或更換培養基;

  5. 適用于基因過表達、基因敲減、敲除的常規轉染操作,亦適用于微孔板的高通量轉染操作

貨號

名稱

適用性

EF007

EndoFectin&trade; Expi293 轉染試劑 (1 mL)

專注轉染懸浮細胞293F,轉染效率極高

EF009

EndoFectin&trade; Expi293 增強轉染試劑盒 (1L 轉染用量)

EF010

EndoFectin&trade; Expi293 增強轉染試劑盒 (10L 轉染用量)

 

※ EndoFectin&trade; HepG2特別為常用細胞系HepG2進行優化設計

 

產品特性

  1. 特別為常用細胞系HepG2進行優化設計,HepG2是一種通常情況下較難轉染的細胞;

  2. 與Lipofectamine&reg; 2000、Lipofectamine&reg; 3000相比,對HepG2細胞有更高的轉染效率;

  3. 在HepG2細胞的轉染效果可與電轉染方法媲美,方便您以更簡便快捷的方式獲得高轉染效率;

  4. 對比Lipofectamine&reg; 2000,對siRNA和質粒都有更高的轉染效率;

  5. 進行轉染操作時,不需提前去除細胞培養液或血清;

  6. 進行轉染操作后,不需清洗細胞或更換培養基。

 

貨號

名稱

適用性

EF005

EndoFectin&trade; HepG2 轉染試劑 (1 mL)

為常用細胞系HepG2進行優化設計

EF006

EndoFectin&trade; HepG2 轉染試劑 (3 mL)

 

※ EndoFectin&trade; Lenti(一種基于陽離子轉染原理的、高效的轉染試劑)

 

產品特性

  1. 轉染293T細胞,可收獲更高滴度的慢病毒

  2. 對比市場其它同類型產品,EndoFectin&trade; Lenti可為慢病毒包裝操作帶來更高的轉染效率和更高的產物滴度(如下圖)

 

EndoFectin&trade; Lenti

 

貨號

名稱

適用性

EF001

EndoFectin&trade; Lenti轉染試劑 (1 ml)

轉染293T細胞,可收獲更高滴度的慢病毒

EF002

EndoFectin&trade; Lenti轉染試劑 (3 ml))

GeneCopoeia致力于為國內生命科學工作者提供一流的產品和及時周到的服務,通過豐富的基因、蛋白、抗體、分析試劑盒等產品線,加速您的研究進程。作為GeneCopoeia在中國的區域一級代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia產品以及客戶訂制化服務。

 

作為GeneCopoeia在中國的區域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia公司產品以及客戶訂制化服務。

 

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