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脂質體轉染試劑:特別配制,毒性低,轉染效率高

發布者:艾美捷科技    發布時間:2024-04-18     
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艾美捷脂質體轉染試劑(ABS-G2500)是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑,毒性低,轉染效率高。且對多種類型的細胞和培養板都具有高轉染效率。

單位:1.0 毫升

存儲條件:存儲于4?C。請勿冷凍。

特點:Z小毒性

 

脂質體轉染試劑應用:

1、非常適合懸浮細胞(左圖)

2、倍更高的表達式(右圖)

脂質體轉染試劑

左圖:abm的Susfectin?轉染試劑可以高效轉染懸浮細胞。使用Susfectin?轉染試劑(目錄號G4000),用亂序siRNA-GFP慢載體(目錄號LV015-G)轉染HEK293懸浮細胞。

右圖:與PEI相比,Susfectin?的表達高出2倍。使用競爭轉染試劑Susfectin TM(目錄號G4000)或線性PEI轉染CHO細胞。使用ELISA定量上清液中的重組抗體水平。

 

脂質體轉染試劑使用方法:

請使用以下條件作為指導,以在6孔板或35毫米培養皿中轉染哺乳動物細胞。

1. 在轉染前18至24小時,以70%的密度播種細胞。對于懸浮細胞,以5 x 10^5 細胞/毫升的密度播種。

2. 對于每個轉染樣本,請按以下方式準備復合物:

溶液A:將2.0微克的DNA稀釋到100微升無血清、無抗生素的培養基中。

溶液B:在使用前通過彈動試管混合DNAfectin? Plus,然后將6-10微升的DNAfectin? Plus稀釋到100微升無血清、無抗生素的培養基中。

在室溫下孵育溶液A和溶液B 5分鐘。

3. 合并溶液,輕輕混合以確保均勻分布,并在室溫下孵育20分鐘。

注意:復合物在室溫下穩定3-5小時。

4. 向每個DNA-轉染復合物中加入0.8毫升無血清培養基,并通過劇烈彈動試管充分混合。

5. 抽吸每個孔中的所有培養基,然后將1.0毫升的轉染試劑復合物直接加入到每個孔中(對于貼壁細胞)。對于懸浮細胞,收集細胞并以300xg離心以收集細胞沉淀,用1.0毫升轉染復合物重懸。然后將細胞和轉染復合物轉移到6孔板中。孵育細胞。

6. 在5-8小時后,移除轉染溶液,加入2.0毫升完整培養基(含血清和抗生素)。繼續孵育細胞。

7. 在48-72小時后,可以使用適當的檢測方法分析轉基因的表達,或繼續進行穩定細胞系的生成。

8. 制造穩定細胞系:在存在選擇標記的情況下,以與殺傷曲線確定中使用的密度相同的密度進行細胞傳代。

 

abm的Susfectin轉染試劑是特別配制的,用于將DNA轉染到真核懸浮細胞中,而無需去除血清/培養基。這種簡化的工作流程使Susfectin成為轉染CHO和293細胞的Z佳選擇。


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